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Efeito da inibição de N-glicosilação sobre o perfil transcricional e proteômico de Paracoccidioides brasiliensis

Processo: 13/10741-8
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Pós-Doutorado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2013
Vigência (Término): 30 de junho de 2016
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica
Pesquisador responsável:Maria Cristina Roque Antunes Barreira
Beneficiário:Fausto Bruno dos Reis Almeida
Instituição-sede: Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto (FMRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Bolsa(s) vinculada(s):13/26382-7 - Papel de galectin-3 na secreção de vesículas extracelulares produzidas por Cryptococcus neoformans, BE.EP.PD
Assunto(s):Paracoccidioides brasiliensis   Proteoma   Transcriptoma

Resumo

Paracoccidioides brasiliensis é o agente etiológico da paracoccidioidomicose, a micose profunda de maior prevalência na América Latina. Dentre os fatores próprios do fungo capazes de aumentar sua patogenicidade são mencionados lipídios, polissacarídeos e glicoproteínas. A glicosilação é importante para a secreção protéica, função, estabilidade e imunogenicidade. Glicanas N-ligadas a proteínas têm sido caracterizadas em diferentes espécies, de mamíferos a leveduras. Em leveduras de P. brasiliensis, N-glicanas exercem importante papel na atividade de N-acetil-²-D-glicosaminidase (NAGase) produzida, e estão diretamente envolvidas no crescimento e morfogênese fúngico. Exercem ainda considerável influência sobre a regulação da expressão de NAGase, a e ²-1,3-glucanase, a-1,4-amilase, bem como de outras enzimas relacionadas a biossíntese/degradação da parede celular de P. brasiliensis. O fato de N-glicanas influenciarem atividades biológicas de proteínas de P. brasiliensis, motiva-nos a investigar, de maneira mais global, os efeitos da inibição da N-glicosilação sobre o transcriptoma e proteoma de leveduras. Para tanto, propomo-nos a cumprir as seguintes metas: (1) avaliar o efeito da inibição de N-glicosilação (proporcionada pelo uso de tunicamicina) sobre o perfil transcricional de P. brasiliensis, por HSS (Hibridização Subtrativa Suprimida); (2) validar os genes diferencialmente expressos por PCR em tempo real (RT-qPCR); (3) avaliar o efeito da inibição de N-glicosilação sobre o perfil proteômico de P. brasiliensis, por 2D-DIGE (Bidimensional - Differential Gel Electrophoresis). Nossa expectativa é de que o cumprimento dessas metas permita que se investigue a existência de associação direta entre o processo de N-glicosilação com genes e proteínas relevantes para o crescimento, a morfogênese e a patogenicidade de P. brasiliensis. (AU)

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Publicações científicas (5)
(Referências obtidas automaticamente do Web of Science e do SciELO, por meio da informação sobre o financiamento pela FAPESP e o número do processo correspondente, incluída na publicação pelos autores)
OLIVEIRA, ALINE FERREIRA; FERNANDES, FABRICIO FREITAS; MARIANO, VANIA SAMMARTINO; ALMEIDA, FAUSTO; RUAS, LUCIANA PEREIRA; OLIVEIRA, LEANDRO LICURSI; OLIVER, CONSTANCE; JAMUR, MARIA CELIA; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA. Paracoccin distribution supports its role in Paracoccidioides brasiliensis growth and dimorphic transformation. PLoS One, v. 12, n. 8 AUG 28 2017. Citações Web of Science: 1.
DA SILVA, THIAGO APARECIDO; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA; CASADEVALL, ARTURO; ALMEIDA, FAUSTO. Extracellular vesicles from Paracoccidioides brasiliensis induced M1 polarization in vitro. SCIENTIFIC REPORTS, v. 6, OCT 24 2016. Citações Web of Science: 14.
FREITAS, MATEUS S.; OLIVEIRA, ALINE F.; DA SILVA, THIAGO A.; FERNANDES, FABRICIO F.; GONCALES, RELBER A.; ALMEIDA, FAUSTO; ROQUE-BARREIRA, MARIA C. Paracoccin Induces M1 Polarization of Macrophages via Interaction with TLR4. FRONTIERS IN MICROBIOLOGY, v. 7, JUL 5 2016. Citações Web of Science: 10.
ALMEIDA, FAUSTO; CAMPOS ANTONIETO, AMANDA CRISTINA; PESSONI, ANDRE MOREIRA; MONTEIRO, VALDIRENE NEVES; PAIVA ALEGRE-MALLER, ANA CLAUDIA; PIGOSSO, LAURINE LACERDA; PEREIRA, MARISTELA; DE ALMEIDA SOARES, CELIA MARIA; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA. Influence of N-glycans on Expression of Cell Wall Remodeling Related Genes in Paracoccidioides brasiliensis Yeast Cells. CURRENT GENOMICS, v. 17, n. 2, p. 112-118, 2016. Citações Web of Science: 3.
ALMEIDA, FAUSTO; SARDINHA-SILVA, ALINE; DA SILVA, THIAGO APARECIDO; PESSONI, ANDRE MOREIRA; PINZAN, CAMILA FIGUEIREDO; PAIVA ALEGRE-MALLER, ANA CLAUDIA; CECLIO, NERRY TATIANA; MORETTI, NILMAR SILVIO; LIMA DAMSIO, ANDRE RICARDO; PEDERSOLI, WELLINGTON RAMOS; MINEO, JOSE ROBERTO; SILVA, ROBERTO NASCIMENTO; ROQUE-BARREIRA, MARIA CRISTINA. Toxoplasma gondii Chitinase Induces Macrophage Activation. PLoS One, v. 10, n. 12 DEC 10 2015. Citações Web of Science: 3.

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