Estudo da via de sinalização pi3k/akt em leucemia mielóide aguda utilizando o monitoramento seletivo de ions (srm).

Resumo

As leucemias mielóides agudas (LMAs) são doenças com prognóstico geralmente desfavorável. Durante a leucemogênese ocorrem diversas alterações no genoma, transcriptoma, proteoma e interactoma que permitem o desenvolvimento da célula leucêmica. Esta surge como consequência da desregulação de inúmeras vias de sinalização celular, que capacitam as células à proliferação celular aumentada, diferenciação prejudicada e resistência a apoptose. Entre estas inúmeras vias de sinalização alteradas, o interesse da presente proposta relaciona-se aos mecanismos relacionados à via do PI3K/AKT que será estudada como um modelo de progressão inicial, proliferação, evasão e apoptose em células leucêmicas. Alterações descritas na via de sinalização PI3K/AKT levam a ativação constitutiva dos alvos downstream, como a quinase AKT. Nosso modelo está baseado no papel da proteína transmembrana adaptadora LAT2, bem como uso de inibidores ou indução da apopotose por drogas que alterem a via de sinalização do AKT em células hematopoiéticas. Para avaliar a regulação desta via, utilizaremos a abordagem proteômica dirigida (targeted proteomics), onde será montado um painel de peptídeos proteotípicos, correspondentes a fragmentos tripsínicos de proteínas relevantes da via PI3K/AKT. Este painel será utilizado para monitoramento de diferentes amostras (tratadas ou não com inibidores de quinases e/ou drogas antineoplásicas, ou ainda, nocauteadas para genes específicos), em larga escala, por cromatografia líquida acoplada à espectrometria de massas, denominado SRM ou MRM (monitoramento de reações selecionadas, ou múltiplas). Com esta abordagem, pretendemos obter as informações funcionais, quantitativas e temporais das proteínas relevantes da via PI3K/AKT em culturas de células consideradas modelos de LMA. A identificação de proteínas alvos e o constante progresso no entendimento das vias de sinalização celular são fundamentais para o avanço no desenvolvimento de novas drogas específicas.