Comparação de dois protocolos de criopreservação (uma ou duas etapas), descongelação (rápida ou lenta) e proposta para um teste de análise espermática funcional do sêmen canino

Resumo

O presente estudo tem como objetivo comparar dois protocolos de criopreservação seminal, duas temperaturas de descongelação do sêmen canino e padronizar e avaliar a eficiência do teste de ligação espermática em membrana perivitelínica de ovos de galinha. Serão selecionados cinco cães machos, em idade reprodutiva e livres de afecções intercorrentes. Os reprodutores terão o sêmen colhido individualmente e separado em dois grupos: Grupo 1, em que o sêmen será criopreservado em uma etapa (adicionando o diluidor contendo glicerol a 37º), e Grupo 2, no qual será realizada a criopreservação em duas etapas (adicionando o glicerol após a refrigeração do sêmen pré-diluído). Na descongelação das amostras dos diferentes grupos serão testados dois protocolos: Desc A: 37ºC por 30 segundos e Desc B: 70ºC por 8 segundos. As avaliações das amostras pré-congelação e pós-descongelação serão: concentração espermática, motilidade subjetiva, vigor, análise computadorizada da motilidade (CASA), estresse oxidativo (TBARS induzido), atividade mitocondrial (DAB), permeabilidade de membrana plasmática (Eosina/Nigrosina), morfologia espermática (formol salino), integridade de acrossomo (POPE) e teste de ligação espermática em membrana perivitelínica de ovos de galinha. Os resultados serão comparados a fim de verificar qual técnica de congelação e descongelação garantem maior sobrevivência aos espermatozoides e se o teste de ligação espermática em membrana perivitelínica de ovos de galinha pode ser validado como método de análise funcional do sêmen na espécie canina. (AU)