Interação microbiana entre bactérias cariogênicas: avaliação do crescimento, da atividade metabólica, da composição bioquímica e da suscetibilidade à clorexidina de biofilmes formados in vitro

Resumo

A proximidade entre os micro-organismos presentes no biofilme dentário determina a existência de interações entre eles, que podem beneficiá-los. Neste estudo buscar-se-á avaliar a interação entre Streptococcus mutans ATCC 35688 com Actinomyces naeslundii ATCC 19039 e Streptococcus sobrinus ATCC 33478, no biofilme formado in vitro. Inicialmente, o crescimento dos biofilmes será padronizado quanto à concentração de bactérias e ao período de crescimento (24, 48 e 72 h). Os biofilmes crescerão em triplicata na superfície de lamínulas de vidro em caldo BHI suplementado com sacarose 0,2% (v/v), utilizando um modelo de aderência ativa. O número de UFC/mL de cada bactéria será obtido após cultivo em meios seletivos e/ou diferenciais, com o auxílio de um estereomicroscópio. Em seguida, será verificada a atividade metabólica (através do ensaio de XTT), a composição bioquímica (através da verificação da produção de proteínas, carboidratos e ácido lático). Para avaliação da suscetibilidade à clorexidina, biofilmes crescerão em um reator de fluxo. O efeito imediato da clorexidina e a retomada do crescimento após 24 h serão avaliados por microscopia confocal. Os resultados dos testes microbiológicos, metabólicos e bioquímicos serão analisados com auxílio do programa GraphPad Prism versão 3.02, com nível de significância de 5%. As imagens obtidas por microscopia confocal serão analisadas com o programa COMSTAT. (AU)