Papel da fosforilação do resíduo 552 na regulação da atividade e da distribuição subcelular do NHE3 em condições fisiológicas e fisiopatológicas

Resumo

A isoforma 3 do trocador Na+/H+ NHE3 é uma proteína de transporte responsável por grande parte da reabsorção de NaCl, NaHCO3 e, consequentemente, de água, em túbulos proximais renais. Este transportador desempenha, portanto, papel essencial na homeostase de volume e na determinação dos níveis de pressão arterial sistêmica. A atividade do NHE3 é modificada por meio de uma série de mecanismos moleculares, dentre os quais a fosforilação da serina 552, sítio consenso para proteína cinase A (PKA). Estudos mostram que há uma dissociação temporal entre a fosforilação do resíduo 552 e a inibição da atividade do NHE3 mediada por PKA, sugerindo que a inibição na atividade do NHE3 promovida pela fosforilação deste resíduo é indireta. Sabe-se que o NHE3 é diferencialmente regulado antes e após o desenvolvimento da hipertensão arterial por mecanismos que envolvem alterações nos níveis de fosforilação da serina 552 e da redistribuição do transportador entre os microdomínios da membrana apical de túbulos proximais. Sendo assim, pretende-se testar a hipótese de que a atividade do NHE3 é diminuída quando ele está fosforilado na serina 552 em virtude de sua redistribuição entre os microdomínios da membrana apical do túbulo proximal renal e/ou por interação com diferentes complexos proteicos multiméricos. Em seguida, visando compreender de que maneira a fosforilação de proteínas presentes em túbulo proximal renal estaria contribuindo para o desenvolvimento da hipertensão, identificaremos as proteínas que são diferencialmente reguladas por PKA antes e após o desenvolvimento da hipertensão em SHR. Além disso, identificaremos as proteínas que se associam especificamente com o NHE3 quando este se transportador se encontra fosforilado na serina 552 e avaliaremos se estas proteínas apresentam distribuição desigual entre os microdomínios da membrana apical de túbulos proximais renais na hipertensão arterial. (AU)