Peptídeo C16, derivado da laminina, regulando a expressão de potenciais biomarcadores do câncer de mama.

Resumo

O câncer de mama representa importante problema de saúde pública. O microambiente onde as células neoplásicas se encontram desempenha importante papel na tumorigênese e progressão tumoral. Nosso Laboratório estuda o papel da laminina e de seus peptídeos bioativos na biologia tumoral. Verificamos que o peptídeo C16, derivado da laminina-111, regula a expressão gênica diferencial em tumores de mama (DE SOUZA SANTOS, 2011). O peptídeo C16, presente no braço curto da cadeia gama 1, estimula a expressão dos genes GPNMB e SPOCK1. Esses resultados foram obtidos na linhagem tumoral de mama MDA-MB-231. Nesse projeto, avaliaremos a ação do peptídeo C16 na expressão das moléculas codificadas pelos genes GPNMB e SPOCK1 que, além de regular adesão celular, migração e metástases, podem ser potenciais biomarcadores tumorais. Dessa forma, utilizaremos linhagens de câncer de mama com diferentes comportamentos, como MBA-MB-231 (basal-like, triplo negativo para receptores de estrógeno, progesterona e HER2) e MCF-7 (luminal B HER2 positiva). Para fins comparativos utilizaremos células normais de mama (MCF-10A). As três linhagens serão tratadas por C16, sendo a expressão de GPNMB e SPOCK1 analisada por immunoblot. Para correlacionarmos expressão protéica e função celular, investigaremos se o peptídeo C16 induziria invasividade das linhagens tumorais MDA-MB-231 e MCF-7. Adicionalmente, através de bloqueio de função por anticorpos, analisaremos se GPNMB e SPOCK1 estariam relacionadas à invasão porventura desencadeada pelo peptídeo. Finalizando, visando contextualizar in vivo nossos resultados in vitro, estudaremos o potencial papel de GPNMB e SPOCK1, como biomarcadores tumorais, por meio da imunodetecção dessas moléculas em tecido mamário normal e tumoral, valendo-se de lâminas de Tissue Microarrays, (TMAs). Buscaremos correlacionar o perfil de expressão dessas moléculas com dados clínicos dos pacientes, entre eles estadiamento e curva de sobrevida.