Análise da expressão gênica de chaperonas redox da família da dissulfeto isomerase protéica na Síndrome de Marfan

Resumo

Estresse do retículo endoplasmático é um mecanismo comum a várias doenças cardiovasculares, incluindo aterosclerose e hipertensão. Uma chaperona que está relacionada ao estresse do RE e vem sido estudada em nosso laboratório é a PDI (dissulfeto isomerase proteica, isoforma PDIA1), que se associa à NADPH oxidase vascular e exerce um papel importante na convergência entre estresse do RE e estresse oxidativo. Estudos preliminares do laboratório indicam interação física entre a PDI e a fibrilina-1, uma proteína da matriz elástica cujo processamento ocorre no RE e sua mutação determina a Síndrome de Marfan (SM). Manifestações cardiovasculares na SM são as principais responsáveis pelo elevado índice de morbi-mortalidade da doença, no entanto os mecanismos celulares e moleculares envolvidos na gênese do fenótipo vascular característico ainda não estão esclarecidos. A SM decorre de mutação na fibrilina-1 (proteína da matriz elástica), cujo processamento ocorre no retículo endoplasmático (RE). Além disso, dados em andamento no grupo indicam que: 1) A expressão da PDIA1 aumenta muito entre 3 e 6 meses de idade nos animais com SM, coincidindo com o agravamento da doença vascular; 2) estudos funcionais, utilizando fibroblastos embrionários extraídos de animais controle ou com SM, demonstraram que o silenciamento da PDI aumenta a taxa de secreção da fibrilina-1, sugerindo que a PDI atua como um fator de retenção da fibrilina-1 no RE e 3) Por meio da análise da expressão gênica por PCR em tempo real, a expressão de Erp57, outra chaperona da família da PDI, aumenta significativamente em camundongos SM com 6 meses de idade. Desta forma, estes resultados sugerem que outras proteínas da família da PDI e associadas a ela podem ser super-expressas e interferir na fisiopatologia das alterações vasculares na SM. Nosso objetivo principal é investigar, em fibroblastos embrionários de camundongos WT e com SM, possíveis alterações na expressão de proteínas da família da PDI e de marcadores de estresse do RE. (AU)