Expressão de microRNAs envolvidos com o crescimento muscular do pacu (Piaractus mesopotamicus): análises in vivo e in vitro

Resumo

O pacu (Piaractus mesopotamicus) apresenta excelentes características zootécnicas, como rápido crescimento e alta fecundidade, fatores que propiciam o sucesso de sua criação intensiva. Nos peixes, o músculo esquelético branco corresponde a maior parte da massa muscular, cujo crescimento ocorre por hipertrofia e/ou hiperplasia, processos regulados por várias moléculas sinalizadoras. Em mamíferos, tem sido sugerido que uma classe de pequenos RNAs não codificantes, conhecidos como microRNAs, regulam a expressão de genes alvo, sendo que os microRNAs miR-1, miR-133a, miR-133b e miR-206 participam dos mecanismos de crescimento do músculo esquelético. O objetivo desse trabalho é avaliar a expressão dos microRNAs miR-1, miR-133a, miR-133b, miR-206 e de seus mRNAs alvos no músculo esquelético branco do pacu, através de estudos in vivo e in vitro. Serão avaliados três períodos de desenvolvimento dos pacus (larval, juvenil e adulto). Os peixes serão mantidos e cultivados durante todo o experimento em caixas d'agua de 0,5 m3 dotadas de sistemas de recirculação de água. Serão retirados fragmentos da musculatura lateral profunda, próximo à cabeça. Tanto nos experimentos in vivo quanto nos in vitro, a expressão dos microRNAs e de seus alvos será analisada por Reação em Cadeia da Polimerase após Transcrição Reversa em Tempo Real (RT-qPCR). Para validação dos mRNAs alvos será realizada a técnica de silenciamento dos microRNAs, através da utilização de oligonucleotídeos antisense inibidores. Os dados obtidos serão submetidos a análises estatísticas adequadas. (AU)