Bolsa 13/00446-9 - Embriogênese, In vivo - BV FAPESP
Busca avançada
Ano de início
Entree

Análise in vivo do padrão de expressão de GFP promovido pelo enhancer de glândula anelar de BhC4-1 no final do desenvolvimento embrionário em linhagens transgênicas de D. melanogaster

Processo: 13/00446-9
Modalidade de apoio:Bolsas no Brasil - Iniciação Científica
Data de Início da vigência: 01 de março de 2013
Data de Término da vigência: 31 de dezembro de 2013
Área de conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Nadia Monesi
Beneficiário:Jéssica Aparecida Moretto Altarugio
Instituição Sede: Faculdade de Ciências Farmacêuticas de Ribeirão Preto (FCFRP). Universidade de São Paulo (USP). Ribeirão Preto , SP, Brasil
Assunto(s):Embriogênese   In vivo   In situ   Microscopia de fluorescência   Técnicas histológicas
Palavra(s)-Chave do Pesquisador:D | Desenvolvimento embrionário | enhancers | ensaios funcionais | glândula anelar | glândula protorácica | melanogaster | expressão gênica regulada no desenvolvimento

Resumo

Nosso laboratório dedica-se ao estudo de mecanismos moleculares que promovem o estabelecimento de padrões de expressão gênica regulados no desenvolvimento em eucariotos superiores. Como modelo de estudo utilizamos o gene de pufe de DNA BhC4-1, amplificado e expresso de modo regulado no desenvolvimento no final do quarto estádio larval de B. hygida. A análise funcional da região promotora de BhC4-1 resultou na identificação de elementos cis-reguladores. Dentre os elementos identificados encontra-se o enhancer de glândula anelar de 67 pb (-253/-187), que promove a expressão do gene na glândula anelar a partir do final do desenvolvimento embrionário. A glândula anelar em drosofilídeos é um órgão endócrino complexo composto pelas glândulas protorácicas, pelo corpus allatum e pelo corpus cardiacum. Dados recentes derivados de análises histológicas sugerem que o enhancer de glândula anelar promove a expressão de BhC4-1-lacZ especificamente nas glândulas protorácicas. Além disso, dados oriundos de experimentos de hibridação in situ sugerem que a expressão do RNAm BhC4-1-lacZ pode ser detectada em tempos anteriores à formação da glândula anelar, em células localizadas na região anterior do embrião que possivelmente são destinadas às glândulas protorácicas. Neste contexto, o presente projeto pretende a obtenção de linhagens transgênicas de D. melanogaster transformadas com uma construção (-253/+40)/GFP, na qual o enhancer de glândula anelar estará clonado à montante do gene repórter GFP. As linhagens obtidas serão analisadas in vivo quanto ao padrão de expressão de GFP durante o desenvolvimento embrionário utilizando técnicas de microscopia de fluorescência. Esperamos com esta análise detectar a expressão de GFP em células destinadas às glândulas protorácicas o que nos permitirá acompanhar o processo de migração das mesmas até sua fusão com as demais células que fazem parte da glândula anelar. O projeto é potencialmente interessante, pois embora a glândula anelar constitua o mais importante órgão endócrino larval a descrição da sua origem embrionária ainda encontra-se incompleta, particularmente no que diz respeito ao processo de formação das glândulas protorácicas.(AU)

Matéria(s) publicada(s) na Agência FAPESP sobre a bolsa:
Mais itensMenos itens
Matéria(s) publicada(s) em Outras Mídias ( ):
Mais itensMenos itens
VEICULO: TITULO (DATA)
VEICULO: TITULO (DATA)