Desenvolvimento da resposta imune específica em bezerros e sua influência na resposta vacinal ao vírus da diarréia viral bovina

Resumo

O objetivo geral deste trabalho é acompanhar o desenvolvimento do sistema imune específico de bovinos jovens, assim como verificar sua inter-relação com a imunização passiva e ativa, usando como modelo o vírus da diarréia viral bovina (VDVB). Para tanto, serão utilizados 20 bezerros distribuídos em quatro grupos experimentais (G1 a G4), compostos por cinco bezerros. Os animais dos grupos G1 a G3 serão imunizados com vacina comercial contendo as estirpes NADL e SINGER do VDVB tipo 01 e a estirpe 125 do VDVB do tipo 02 inativadas. Os animais pertencentes ao G4 não serão vacinados (controle). Os bezerros serão primovacinados aos 14 dias pós-nascimento (p.n.) (G01); aos 90 dias p.n. (G02) e aos 180 dias p.n. (G03). Todos os bezerros serão revacinados aos 30 dias após a aplicação da primeira dose da vacina. As amostras de sangue dos animais serão obtidas em três momentos distintos: antes da 1ºdose (T0), antes da 2ºdose (T1) e 30 dias após a última aplicação vacina. As avaliações dos bezerros do G4 serão realizadas em todos os momentos de colheitas dos animais pertencentes ao G1 à G3. Para avaliação da resposta imune serão realizadas as seguintes provas imunológicas: mensuração de anticorpos específicos e dosagem de citocinas sanguíneas pelo método de ELISA (Enzyme Linked Immuno Absorbent Assay); fenotipagem e ativação das subpopulações dos linfócitos sanguíneos CD4+, CD8+, gama delta TCR+, CD21+ e CD25+ pela técnica de citometria de fluxo; e produção de IFN-³ pelas células mononucleares sanguíneas. A distribuição dos dados será avaliada inicialmente pelo Teste de Kolgomorov-Smirnov. Caso estes dados sejam de distribuição paramétrica serão inicialmente submetidos à análise de variância (Teste F), que, sendo significativa confrontar-se-á as médias pelo teste de Duncan. As variáveis com distribuição não-paramétrica serão comparadas pelo teste de Mann-Whitney. As relações entre as variáveis serão estudadas pelo coeficiente de correlação e regressão linear, a qual será submetida à análise de variância para verificação de significância.