Terapia fotodinâmica antimicrobiana no tratamento da periodontite periapical induzida experimentalmente.

Resumo

O objetivo do presente projeto será avaliar quantitativamente, in vivo, o efeito da terapia fotodinâmica antimicrobiana no tratamento da periodontite periapical induzida experimentalmente. Serão utilizados 70 pré-molares de cães (140 raízes) os quais, após indução de lesão periapical, serão divididos em 8 grupos: Nos grupos I e V (20 raízes cada) após o preparo biomecânico, os canais radiculares serão preenchidos com a pasta Calen® por 15 dias, seguido pela obturação com cimento AH Plus. Nos Grupos II e VI (20 raízes cada): após o preparo biomecânico os canais radiculares serão condicionados com o fotossensitizador à base de fenotiazina na concentração de 10 mg/ml durante 1 minuto, decorrido esse período, os canais radiculares serão irrigados com água destilada esterilizada e irradiados com um laser de diodo com comprimento de onda de 660nm e potência máxima de 60mW/cm2, movido a bateria de 20 mW, através da fibra óptica de ponta flexível com diâmetro de 0,6 mm. O fotossensitizador será irradiado tal como recomendado pelo fabricante, durante 1 minuto, num modo de onda contínua e os canais serão obturados com cimento AH Plus. Nos grupos III e VII (20 raízes cada) após o preparo biomecânico os canais radiculares serão obturados na mesma sessão com o cimento AH Plus e nos grupos IV e VIII (10 raízes cada) após o preparo biomecânico os canais permanecerão vazios. Em seguida, os dentes de todos os grupos serão restaurados com amalgama de prata, sobre uma base de ionômero de vidro. Decorridos os períodos experimentais de 28 ±3 dias (Grupos I, II, III e IV) e 90±5 dias (Grupos , V, VI, VII e VIII), os animais serão mortos, as mandíbulas e maxilas removidas e os dentes submetidos ao processamento histotécnico e posteriormente serão desparafinizados e hidratados para a analise imunoistoquímica. Cortes longitudinais de 5 ¼m serão obtidos e corados pela hematoxilina e eosina, tricrômico de Mallory e Brown & Brenn. Na analise microscópica pelo método quantitativo será registrada a descrição completa das características dos tecidos apicais e periapicais e efetuada a quantificação do numero de células inflamatórias e as extensões das áreas da lesão periapical, da reabsorção óssea, da reabsorção apical (cementária e dentinária) e do edema, em mm2. A análise imunoistoquímica será realizada para identificação e localização de fatores envolvidos na osteoclastogênese e os cortes serão submetidos à reação imunoistoquímica mediante a utilização de anticorpos primários para RANK, RANKL e OPG. As imunomarcações serão avaliadas por toda a extensão da raiz dentária, ligamento periodontal, polpa e osso alveolar e os resultados serão expressos de maneira quantitativa. As avaliações serão realizadas em microscópio Axio Imager.M1 (Zeiss), acoplado a uma câmera AxioCam MRc5 (Zeiss). Os valores obtidos serão avaliados quanto ao tipo de distribuição dos grupos e comparados por meio da analise de variância (ANOVA) ou pelo teste não-paramétrico de Kruskal-Wallis, com nível de significância de 5%.