Prevalência e diversidade de bactérias gram-negativas multirresistentes em ambientes aquáticos públicos e fontes de água potável no Estado de São Paulo: impacto clínico e ambiental

Resumo

O uso exacerbado de antibacterianos (ATB) na medicina humana e veterinária tem resultado no aparecimento de bactérias resistentes. Atividades antropogênicas relacionadas ao uso destes compostos têm favorecido para que ambientes aquáticos sejam importantes locais para a sua seleção e/ou disseminação, assim como para a aquisição de elementos genéticos associados. Os agentes antibacterianos mais atingidos pela problemática da resistência são as quinolonas/fluoroquinolonas e beta-lactâmicos. A emergência e disseminação de espécies exibindo resistência para estes agentes têm sido favorecidas pela versátil mobilização e aquisição de determinantes genéticos responsáveis pelo fenótipo. De forma globalizada, este evento genético constitui um grave problema de saúde pública pela consequente restrição de alternativas terapêuticas. No Brasil, o monitoramento da resistência bacteriana a antibióticos tem focado na medicina humana, e existem poucos estudos sobre a disseminação de fenótipos multirresistentes (MR) no ambiente. Deste modo, o presente estudo tem por objetivo monitorar a disseminação de bactérias com perfil de multirresistência aos ATB em ambientes aquáticos públicos e sistemas de abastecimento de água potável no estado de São Paulo, investigando os genótipos predominantes e sua similaridade genética com isolados clínicos. O perfil de resistência dos isolados bacterianos será caracterizado por antibiograma qualitativo (Kirby-Bauer) e quantitativo (CIM) seguindo as recomendações do CLSI, sendo incluídos antibacterianos de uso humano e veterinário. A produção de beta-lactamases adquiridas (ESBL, KPC, MBL) será avaliada fenotipicamente utilizando inibidores específicos (clavulanato, ácido fenilborônico e EDTA). Genes mediados por plasmídeos, conferindo resistência a cefalosporinas de amplo espectro e carbapenemases, ou codificando resistência as quinolonas (PMQR: aac(6')-1b-cr, OqxAB, qepA, qnr) serão identificados por PCR e sequenciamento. A similaridade genética das espécies multirresistentes será avaliada por ERIC-PCR e/ou PFGE realizando uma análise comparativa com espécies clínicas MR, previamente caracterizadas como endêmicas em centros médicos. Especificamente para produtores de carbapenemases, será realizada uma análise ancestral por MLST. Para isolados de Escherichia coli serão adicionalmente identificados os grupos filogenéticos de virulência. Os resultados permitirão visualizar o panorama atual da resistência aos antibacterianos em bactérias que podem ser isoladas de ambientes aquáticos públicos e água potável, podendo inferir sobre o impacto clínico e ambiental do uso exacerbado de compostos com atividade antimicrobiana, identificando os locais públicos com maior potencial para a disseminação e/ou transmissão destes agentes tanto para seres humanos como para ecossistemas associados, na região mais urbanizada do Brasil. (AU)