Marcadores genéticos e bioquímicos para diagnóstico, prognóstico e tratamento do carcinoma hepatocelular

Resumo

INTRODUÇÃO: Carcinoma hepatocelular (CHC) é o tipo mais comum de câncer de fígado. Os fatores de risco para CHC incluem hepatites C e B, cirrose alcoólica, exposição prolongada à aflatoxina, doenças metabólicas hereditárias, além de alterações genéticas que podem afetar diversas vias celulares. Nesse caso, destaca-se o fator de crescimento endotelial vascular (VEGF), uma glicoproteína de ligação à heparina que atua como fator de permeabilidade vascular e tem sido associado ao processo carcinogênico em diferentes casuísticas. OBJETIVO: Avaliar a expressão dos genes VEGF, alfa-fetoproteína, cistatina B e beta catenina em tecido hepático de pacientes com cirrose ou carcinoma hepatocelular; avaliar a associação dos níveis séricos de VEGF, alfa-fetoproteína, cistatina B e beta catenina e suas respectivas variantes genéticas em pacientes com CHC, cirrose, HCV e controles, bem como analisar a razão de chance para CHC, com relação aos fatores clínicos, genéticos e bioquímicos nos diferentes grupos estudados. MÉTODOS: Serão selecionados 400 indivíduos, independente de sexo, grupo étnico e idade, distribuídos em quatro grupos. Grupo 1- 100 indivíduos com diagnóstico de CHC; Grupo 2- 100 indivíduos com diagnóstico de cirrose; Grupo 3- 100 indivíduos com diagnóstico de HCV; Grupo 4- 100 indivíduos controles, sem sinais clínicos e bioquímicos da doença. As variantes para VEGF, alfa-fetoproteína, cistatina B e beta catenina serão analisadas por reação em cadeia da polimerase (PCR) convencional, gel de agarose e coloração com brometo de etídeo. O produto pós-PCR de VEGF, alfa-fetoproteína, cistatina B e beta catenina serão submetidos à RFLP (restriction fragment length polymorphism) com a enzima de restrição Ban II, Msp I, Ram I e Nla III. (Fermentas), respectivamente. As dosagens bioquímicas serão realizadas pelo método de EIA (Imunoensaio Enzimático) e ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay). A expressão gênica será avaliada por qRT-PCR (quantitative Reverse Transcription Polymerase Chain). A análise estatística compreenderá teste exato de Fisher, t Student e regressão multivariada com nível de significância P<0,05.