Análise in vivo da relação entre hipóxia e estresse oxidativo sobre o desenvolvimento embriofetal do pâncreas de descendentes de ratas diabéticas

Resumo

Introdução: A presença do diabete na gestação leva a alterações hormonais e metabólicas tornando o ambiente intrauterino inadequado, o que favorece o aparecimento de complicações maternas e fetais, podendo repercutir na vida adulta destes indivíduos. A hiperglicemia induz aumento na produção de espécies reativas de oxigênio (ERO), que é reconhecido como uma das principais causas de complicações clínicas associadas ao diabete. Outros estudos também demonstram a sensibilidade embrionária e fetal às alterações na tensão de oxigênio. Os fatores induzíveis por hipóxia (HIF) são identificados como reguladores de expressão gênica de produtos que exibem atividade antioxidante em resposta à presença de ERO. A tensão parcial de oxigênio regula o desenvolvimento embrionário de vários órgãos, inclusive do pâncreas. O Pdx-1-1 é um fator de transcrição necessário para o desenvolvimento do pâncreas. A inativação do Pdx-1 em células ², em idade gestacional tardia, resulta em diminuição da proliferação dessas células. Iessi (2012) observou que descendentes de ratas expostos a um ambiente intrauterino hiperglicêmico tiveram níveis alterados dos hormônios pancreáticos (glucagon e somatostatina) ao nascimento. No período neonatal, os níveis de somatostatina continuaram alterados, ao contrário dos níveis de glucagon e insulina. Estes resultados demonstraram que a somatostatina foi o hormônio mais suscetível a mudanças no meio intrauterino, o qual poderia ser utilizado como preditor de efeitos adversos na vida adulta. Objetivo: Avaliar o quadro de estresse oxidativo e hipóxia sobre o desenvolvimento pancreático embriofetal em condições hiperglicêmicas. Material e Método: Os pâncreas dos embriões das ratas Wistar (não-diabéticas, com diabete moderado e com diabete grave) serão retirados e estudados nos dias 11,5, 18,5 e 21,5º de prenhez para análise imunoistoquímica dos hormônios endócrinos (somatostatina, glucagon e insulina), índice proliferativo (Ki67) e de Pdx-1 e expressão gênica e protéica de marcadores de hipóxia (HIF-1 alfa) e de estresse oxidativo (superóxido dismutase, catalase e glutationa peroxidase) pelas técnicas de qRT-PCR real time e de Western blotting, respectivamente. Meta: Identificar marcadores biológicos relacionados com hipóxia e estresse oxidativo para relacionar com o desenvolvimento embrionário e pancreático visando futuras intervenções para minimizar os resultados adversos perinatais encontrados no estado diabético.