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Análise das mudanças na tradução do RNAm durante a adipogênese e sua regulação por mTORC1

Processo: 12/20638-7
Linha de fomento:Bolsas no Exterior - Estágio de Pesquisa - Doutorado
Vigência (Início): 01 de abril de 2013
Vigência (Término): 31 de março de 2014
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:William Tadeu Lara Festuccia
Beneficiário:Juliana Magdalon
Supervisor no Exterior: Shu-Bing Qian
Instituição-sede: Instituto de Ciências Biomédicas (ICB). Universidade de São Paulo (USP). São Paulo , SP, Brasil
Local de pesquisa: Cornell University, Estados Unidos  
Vinculado à bolsa:11/03972-8 - Modulação da atividade transcricional dos receptores nucleares PPAR-gama, GR e TR-alfa por mTORC1 durante e após a adipogênese, BP.DR
Assunto(s):Transcrição genética

Resumo

A compreensão da biologia do tecido adiposo e dos mecanismos moleculares envolvidos na adipogênese é essencial para o desenvolvimento de terapias para controlar a obesidade e doenças associadas. Apesar de muitos estudos direcionados à regulação da transcrição, ainda não se sabe muito sobre o controle da tradução do RNAm em proteínas. O desenvolvimento da técnica de perfil ribossomal, que permite a análise das posições dos ribossomos e indica quais RNAm estão realmente sendo traduzidos em proteínas, promoveu novo interesse na área, especialmente devido ao uso de inibidores da iniciação da tradução que permitem então a identificação de iniciação alternativa da tradução. Neste projeto, temos o objetivo de caracterizar mudanças nas taxas de tradução de RNAm em proteínas durante a diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos maduros que são independentes de mudanças na transcrição. É também nosso objetivo avaliar o papel do mTOR na regulação da tradução de RNAm durante a adipogênese. Para isso, será realizada a análise da transcrição e tradução do RNAm em diferentes momentos da diferenciação de 3T3-L1 em adipócitos maduros usando uma combinação de "global translation initiation sequencing" e RNA-seq. Dessa forma, células 3T3-L1 serão coletadas após 0 h, 4 h, 12 h, 24 h e 48 h da adição do coquetel de adipogênese (insulina, IBMX e dexametasona) na ausência ou presença do inibidor de mTOR torina para posterior realização de "global translation initiation sequencing" e RNA-seq. (AU)

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