Avaliação da influência de materiais reembasadores resilientes na integrina alfa 5 beta 1 de queratinócitos

Resumo

Os materiais reembasadores resilientes têm sido utilizados em áreas de tecidos ulcerados e inflamados pela ação mecânica de próteses mal adaptadas, em próteses obturadoras após cirurgias maxilo-faciais, em casos que apresentam áreas recém operadas, regiões com lesões crônicas, trauma na mucosa bucal, bruxismo, pacientes com avitaminoses ou doenças debilitantes e em próteses imediatas ou durante o período de osseointegração de implantes. Sabe-se também que, no processo de cicatrização, as integrinas e seus ligantes são importantes na regulação da proliferação, diferenciação e migração celular. Assim, o objetivo deste estudo será avaliar a influência de 2 materiais reembasadores à base de silicone (Ufigel P e Sofreliner S), 2 à base de resina acrílica (Durabase Soft e Trusoft) e 2 condicionadores de tecidos (Softone e Coe Comfort) na integrina alpha5Beta1 em células HaCat, após o contato direto por períodos de 24 ou 48 horas. Corpos de prova de cada material (10 X 1 mm) serão confeccionados e colocados, individualmente, nos orifícios de placas de cultura e as células (1 × 105 células/mL) serão semeadas em contato direto com os mesmos. Orifícios contendo lamínulas de vidro esterilizadas, com as mesmas dimensões dos corpos de prova, serão utilizados como controle. Em seguida, as placas serão incubadas a 37ºC com 5% de CO2 e 95% de ar por 24 ou 48 horas. Para a análise da integrina alpha5ß1 será utilizado o Kit de integrina total humana alpha5ß1 (Duo Set IC - R & D Systems, Inc), seguindo-se o protocolo determinado pelo fabricante. A densidade óptica será determinada imediatamente, utilizando-se o leitor de microplacas com comprimento de onda de 450 nm e 570 nm. Os experimentos serão realizados em duplicata, a média das duas leituras será calculada e, desse valor, será subtraída a média do valor padrão de densidade óptica zero. Inicialmente, será construída uma curva padrão colocando-se as médias de absorbância de cada concentração da solução padrão (integrina total alpha5Beta1) no eixo Y e as concentrações no eixo X. A concentração de integrina alpha5Beta1 de cada amostra testada será obtida interpolando-se a média das leituras das duplicatas na curva-padrão. (AU)