Caracterização molecular de plasmídeos carreadores de genes codificadores de beta-lactamases de espectro estendido em Enterobactereaceas isoladas de suínos

Resumo

No Brasil, os estudos sobre resistência bacteriana em cepas de origem animal, inclusive suínos, são escassos ou pouco aprofundados. Neste contexto, a caracterização dos plasmídeos carreadores de genes de resistência, assim como das estirpes que os possuem será de suma importância epidemiológica e de grande impacto no estudo da origem da resistência bacteriana. Plasmídeos são elementos genéticos móveis frequentemente associados à emergência e disseminação de resistência antimicrobiana. O objetivo do presente projeto é contribuir no esclarecimento da origem e disseminação de beta-lactamases de espectro estendido (ESBL) no Brasil através da caracterização molecular de plasmídeos carregando genes do tipo blaESBL oriundos de cepas de Escherichia coli, Salmonella enterica e Klebsiella pneumoniae isoladas de fezes de suínos comerciais como também estabelecer a relação clonal entre essas cepas através do sequenciamento de multilocus (Multilocus sequence typing - MLST). O perfil de suscetibilidade a antimicrobianos beta lactâmicos será determinado pelo método de difusão em disco (Kirby-Bauer) e confirmado pela determinação da concentração inibitória mínima nas cepas resistentes. A produção de ESBL será identificada pelo teste da aproximação de discos (DDT) e através da pesquisa dos genes blaCTX-M, blaTEM e blaSHV pela PCR. Os plasmídeos carregando genes codificadores de ESBL serão extraídos e transformados na cepa receptora Escherichia coli Top10 e caracterizados quanto ao grupo de incompatibilidade e peso molecular. O perfil das cepas carregando esses plasmídeos será determinado através do MLST e depositado no banco de dados da espécie (http://pubmlst.org/databases.shtml). (AU)