Investigação de mecanismos epigenéticos regulados por HIF1A e seus alvos transcritos em linhagem de meduloblastoma exposta ao ambiente de hipóxia

Resumo

O Meduloblastoma é o tumor cerebral de maior incidência em crianças e adolescentes e origina-se das células precursoras neurais da camada granular do cerebelo. Seu tratamento inclui cirurgia, quimioterapia e de acordo com a idade e estadiamento do tumor, radioterapia. O meduloblastoma (MB) é o tumor cerebral maligno de maior incidência em crianças e adolescentes. Trata-se de uma neoplasia de alto grau de malignidade, sendo o tratamento padrão atualmente disponível composto por cirurgia, quimioterapia e radioterapia. O uso de terapias mais efetivas, que garantam uma maior sobrevida e menos efeitos tardios relacionados ao tratamento é bastante desejável para MBs. Deste modo, a busca por novos alvos terapêuticos torna-se cada vez mais importante para o tratamento desta neoplasia na infância. Estes alvos podem estar envolvidos com a regulação homeostásica celular ou mecanismos epigenéticos que acarretam maior agressividade e letalidade ao tumor. Genes como o HIF1A (fator indutor de hipóxia), VEGF (fator de crescimento vascular endotelial), CA9 (anidrase carbônica 9) e SLCA2A1 (transporte de glicose facilitado) estão relacionados com um prognóstico desfavorável em diversos tipos de tumores humanos. O HIF1A, quando ativado, inicia a transcrição de diversos outros genes responsáveis por metástase e resistência ao tratamento. Todavia, os mecanismos regulatórios da expressão gênica de HIF1A ainda são pouco conhecidos. Neste projeto teremos como objetivo avaliar a participação de mecanismos epigenéticos na regulação da expressão de HIF1A e de alguns dos seus alvos efetores (VEGF, CA9 e SLC2A1). Pretende-se ainda e comparar o estado de metilação e a expressão destes genes em diferentes situações de hipóxia e normoxia. A metodologia de estudo incluirá o silenciamento de HIF1A na linhagem de meduloblastoma UW402 submetida à hipóxia, pirosequenciamento e methylation array pré/pós inibição genica. (AU)