Funcao mitocondrial durante a adipogenese no tecido adiposo branco (tab): efeito de acidos graxos.

Resumo

A biogênese e o metabolismo mitocondrial estão envolvidos na regulação de vários processos no tecido adiposo branco, como a adipogênese, o metabolismo de lipídios e carboidratos, a proliferação de pré-adipócitos, a de-diferenciação de adipócitos e o acúmulo de triacilgliceróis, no entanto, esse tema ainda está sob debate. Este projeto tem como objetivo investigar o efeito de ácidos graxos (AG) saturados e insaturados no metabolismo mitocondrial e sua implicação na diferenciação de pré-adipócitos em adipócitos maduros (adipogênese). Serão utilizadas células clonais 3T3-L1 e pré-adipócitos primários dirigidos para a diferenciação em adipócitos maduros. Essas células serão tratadas com os AG palmítico (C16:0), palmitoléico (C16:1 w-7), linoléico (C18:2, w-6), eicosapentaenóico (EPA, C20:5 w-3) e docosa-hexaenóico (DHA, C22:6 w-3) em períodos diferentes da cultura celular. Os seguintes parâmetros serão avaliados: a biogênese e o metabolismo mitocondrial; o potencial adipogênico de pré-adipócitos primários e 3T3-L1; a expressão gênica do coativador do receptor ativado por proliferadores de peroxissoma gama (PGC1-alfa), do fator "A" de transcrição mitocondrial (Tfam), da carnitina palmitoil transferase-1 (CPT-1), do fator respiratório nuclear 1 (NRF1), da proteína desacopladora mitocondrial 2 (UCP2), da superóxido dismutase dependente de manganês (MnSOD) e a análise proteômica mitocondrial durante a adipogênese. Serão empregados métodos de fluorimetria, luminescência, RT-PCR em tempo real, western blotting e proteômica. A partir dos resultados obtidos contribuiremos para a elucidação do papel da mitocôndria e de diferentes AG na adipogênese.