Efeitos da congelação lenta e vitrificação na viabilidade, ultraestrutura e expressão gênica de embriões caninos

Resumo

Manipulação de gametas, cultivo embrionário e criopreservação de embriões, utilizando o cão como modelo experimental, podem levar ao desenvolvimento de técnicas que permitam preservar material genético de canídeos ameaçados de extinção. Objetiva-se com este estudo viabilizar e comparar os processos de criopreservação - congelação lenta x vitrificação de embriões caninos e avaliar o efeito desses procedimentos na viabilidade, ultraestrutura e expressão gênica desta estrutura. Os embriões serão produzido in vivo através de inseminações artificiais programadas; as cadelas serão submetidas a OSH e os embriões coletados na fase de blastocistos. Serão utilizados 102 embriões caninos divididos em três grupos, Controle (CONT, n = 34), Vitrificado (VITR, n = 34) e Congelado (CONG, n = 34). O grupo VITR será vitrificados pela técnica "two step" e o grupo CONG congelado em máquina de congelação programável. Após a coleta, aquecimento e descongelação os embriões permanecerão por 24 horas em cultivo in vitro em meio SOFaa. As avaliações de reexpansão, viabilidade por sondas fluorescentes, expressão gênica e microscopia eletrônica serão realizadas em todos os grupos.