Miosina-5A humana e o transporte intracelular de cargoes: estudos dos complexos de miosina-5A e proteínas adaptadoras

Resumo

Algumas proteínas pertencentes à superfamília das miosinas se deslocam ao longo dos filamentos de actina utilizando a hidrólise do ATP para transportar vesículas, organelas, RNA mensageiro, complexos proteicos e outros cargoes. Devido a sua ubíqua distribuição em eucariotos, destacam-se os estudos voltados à miosina-5A (MYO5A), um motor molecular homodimérico com estrutura primária semiconservada ao longo da evolução e que possui em sua extremidade C-terminal o Domínio da Cauda Globular (DCG); este composto basicamente por alfa-hélices distribuídas em dois subdomínios (como demonstrado para seu ortólogo em S. cerevisiae), aos quais se ligam os cargoes a serem transportados. Muitas vezes, o transporte de cargoes não se dá pela interação direta destes com a MYO5A e, por isso, é comum a presença de uma proteína adaptadora (PA). Logo, o comprometimento da interação entre a MYO5A e a PA e, por consequência, do transporte intracelular de cargoes, pode levar o organismo afetado a fenótipos indesejados, sendo o principal exemplo a Síndrome de Griscelli, uma doença caracterizada por gerar quadros de albinismo cutâneo e capilar assim como severos transtornos neurológicos. Motivados a esclarecer processos nos quais a MYO5A humana possa estar envolvida, realizamos screening em uma biblioteca de cérebro fetal humano (onde a MYO5A é expressa mais abundantemente) utilizando a técnica de Duplo-Híbrido em Levedura a fim de identificar PAs inéditas para o DCG (experimentos conduzidos durante a iniciação científica). Portanto, o presente trabalho tem por objetivo validar as interações identificadas durante o screening, postular sua importância funcional e vias de regulação através de estudos biofísicos e estruturais dos complexos MYO5A-PA no intuito de aprofundar o atual entendimento sobre os mecanismos moleculares envolvidos no transporte de cargoes, assim como das doenças potencialmente associadas. (AU)