Análise dos defeitos do gene do receptor do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRHR): frequência de mutações na população brasileira e estudo do efeito fundador da mutação p. R139H

Resumo

O hipogonadismo hipogonadotrófico isolado (HHI) congênito é causado por um defeito na produção ou secreção do hormônio liberador de gonadotrofinas (GnRH) pelo hipotálamo ou pela resistência hipofisária à sua ação. As primeiras mutações inativadoras relacionadas ao HHI normósmico foram descritas por de Roux et al. em 1997 no gene do receptor de GnRH (GNRHR)., Desde então diversas mutações foram descritas nesse gene, sendo esta, atualmente, a causa genética mais freqüente de HHI congênito normósmico. Costa, et al. (2001) estudaram o gene GNRHR em pacientes brasileiros com HHI normosmico pertencentes a quatorze famílias e descreveram pela primeira vez a mutação p.R139H em homozigose. Uma recente ampliação do estudo do gene GNRHR na casuística de HHI normósmico foi realizada no Laboratório de Hormônios e Genética Molecular LIM/42 e a variante p.R139H foi identificada em mais três pacientes, sendo dois casos familiares (dados ainda não publicados). Assim, considerando a elevada freqüência da mutação germinativa p.R139H na população brasileira, é provável que essa mutação tenha uma origem comum. Recentemente Vaaralahti et al. (2011) expandiu o estudo do gene GNRHR analisando pacientes com atraso constitucional do desenvolvimento puberal. Nesse estudo uma nova deleção (p.F309del) foi identificada em um paciente, a qual segregou com o fenótipo de atraso puberal entre os membros da família e estava ausente nos 200 controles. Baseado nesses dados, nossos objetivos são analisar a freqüência de mutações no GNRHR em pacientes com HHI normosmico e atraso constitucional do desenvolvimento puberal e rastrear a ancestralidade genética da mutação p.R139H, visando estabelecer a presença de um efeito fundador no surgimento dessa mutação. Estudaremos 94 pacientes não relacionados, portadores de HHI normósmico (69 homens e 25 mulheres), sendo 6 casos familiais. Adicionalmente, estudaremos 51 pacientes com atraso constitucional do crescimento e desenvolvimento (42 meninos e 9 meninas). Os três exons de GNRHR serão ampilficados por PCR a partir de do DNA genômico dos pacientes selecionados e sequenciados automaticamente. Para a análise de efeito fundador serão selecionado tags SNPs localizados pelo programa Haploview. O DNA genômico será amplificado em reações de PCR, utilizando pares de oligonucleotídeos específicos para cada tag SNP e analisadas pelo programa de análise de fragmentos GeneScan. (AU)