Análise da interação da hemoglobina extracelular gigante de Glossoscolex paulistus (HbGp) com surfactantes iônicos por calorimetria de titulação isotérmica

Resumo

A hemoglobina extracelular do anelídeo Glossoscolex paulistus (HbGp) é uma hemoglobina gigante constituída de uma massa molecular de 3,6 x 106 Da. A estrutura oligomérica da HbGp é também composta de dupla camada hexagonal, sendo que a dissociação dessa estrutura leva a formação de 1/12 da molécula íntegra. Devido a sua natureza extracelular e resistência a oxidação, as hemoglobinas extracelulares vem sendo propostas como modelos de sistemas úteis para o desenvolvimento terapêutico de substitutos sanguíneos. A interação entre HbGp e surfactantes ganhou um interesse particular, já que os surfactantes são amplamente empregados em bioquímica e biotecnologia para a solubilização protéica, purificação, caracterização e determinação da estrutura de proteína. Estes estudos são realizados com o objetivo de avaliar os sítios de contato iônico da proteína, assim como o mecanismo de desenovelamento, a dissociação oligomérica e o processo de auto-oxidação. Deste modo, a interação entre HbGp e surfactantes, variando a concentração, proporciona informação significativa em relação ao estado oligomérico da proteína. Porém, a caracterização completa destas interações requer uma quantificação da afinidade de ligação, número de sítios de ligação e a termodinâmica de ligação, que nos dão informações sobre as forças energéticas que geram interações biomoleculares. Desta maneira, este projeto tem por objetivo explorar a técnica de microcalorimetria de titulação isotérmica (ITC) para a caracterização termodinâmica de interações entre HbGp e surfactantes visando um melhor entendimento do mecanismo destas interações. (AU)