Caracterização de biofilme de Candida albicans formado na presença de diferentes fontes de carbono

Resumo

O conhecimento atual da fisiologia fúngica chama atenção para o diferente comportamento destes microrganismos em biofilme. As células que constituem os biofilmes apresentam características fenotípicas diferentes das células em suspensão, tais como um aumento de resistência aos antifúngicos e às defesas do hospedeiro. O potencial de formação de biofilme por espécies de Candida tem sido estudado, contudo a literatura carece de estudos conclusivos a respeito ao tipo de fonte de carbono que potencialize a aderência, formação de biofilmes e acidogenicidade. O presente estudo será dividido em dois subprojetos: subprojeto 1 - objetivará caracterizar o biofilme, formado in vitro, por C. albicans utilizando diferentes fontes de carbono. Serão avaliadas duas cepas padrão de C. albicans, bem como 10 cepas clínicas isoladas de dentina cariada. Para a avaliação do efeito de diferentes carboidratos nas características do biofilme será utilizado meio de crescimento YNB complementado nas concentrações de 10, 50, 100, 200 ou 500 mM de glicose, frutose, galactose, sacarose, maltose, glicose + frutose ou xilitol. A viabilidade do biofilme será avaliada por meio da avaliação de unidades formadoras de colônias por mililitro (UFC/ml) e pela atividade metabólica (XTT). Serão também avaliadas a acidogenicidade e quantificados carboidratos e proteínas no biofilme. O subprojeto 2 visará avaliar a ação do extrato aquoso de Buchenavia tomentosa sobre a viabilidade e acidogenicidade do biofilme formado na condição mais acidogênica (obtida no subprojeto 1). A avaliação da atividade do extrato sobre a viabilidade será obtida contagem de UFC/ml. Além disso, será avaliada a ação do extrato sobre a acidogenicidade do biofilme de C. albicans. Solução de digluconato de clorexidina 0,2% será utilizada como controle. Os resultados serão avaliados por meio de testes estatísticos de comparação com auxílio do programa GraphPad Prism versão 3.02, com nível de significância 5%. (AU)