Perfil de alterações cromossômicas em tumores cerebrais (meduloblastomas e gliomas): impacto na identificação de novas vias tumorigênicas

Resumo

Apesar do desenvolvimento de novas terapias para os tumores cerebrais, a grande maioria dos casos continua incurável, e os sobreviventes sofrem graves efeitos colaterais devidos ao tratamento. Isso deve-se em parte ao baixo entendimento das bases moleculares da patologia dessa doença. Este projeto tem o objetivo de explorar novas vias de carcinogênese através do estudo de instabilidade cromossômica em meduloblatomas e gliomas. Para isso, 200 casos, representando os distintos subtipos histológicos, serão submetidos à tecnica de CGH-array. Esta metodologia permite realizar a pesquisa em todo o genoma de ganhos ou perdas cromossômicas. O perfil de alterações cromossômicas será relacionado com a presença de instabilidade de microssatélites, assim como com dados clinicopatológicos dos pacientes. Posteriormente, as regiões cromossômicas mais frequentemente desreguladas serão alvo de análise bioinformática para identificação de possíveis genes alvo, que serão submetidos à validação por técnicas de FISH. Os genes confirmados serão escolhidos para análise de mudança fenotípica em células imortalizadas, células-tronco neuronais e células primárias de tumores cerebrais através de silenciamento e/ou over-expressão. Os padrões fenotípicos a serem analisados serão proliferação celular, apoptose, movimentação, parada do ciclo celular e invasão. Os genes testados que forem considerados mais importantes para o estudo serão utilizados para avaliação de crescimento através de enxertos in vivo. Para isso, as células com determinados genes silenciados ou over-expressos (e seus respectivos controles) serão injetadas ortotopicamente em camundongos da linhagem nude e os tumores implantados serão subsequentemente avaliados. (AU)