Modulação da atividade transcricional dos receptores nucleares PPAR-gama, GR e TR-alfa por mTORC1 durante e após a adipogênese

Resumo

A compreensão dos mecanismos envolvidos nos processos de proliferação e diferenciação dos adipócitos é essencial para o desenvolvimento de agentes terapêuticos a fim de controlar a obesidade e doenças relacionadas. A proliferação de células progenitoras e sua diferenciação em adipócitos maduros (adipogênese) são regidas por uma rede orquestrada de fatores de transcrição e eventos epigenômicos, que modulam a expressão de diversos genes envolvidos nestes processos. Apesar da ativação da mTOR ser essencial para a proliferação celular e adipogênese, a interação desta via com os diversos receptores nucleares, correguladores e modificações epigenéticas ainda não foi investigada. Dessa forma, o presente projeto tem como objetivo geral investigar o envolvimento do complexo 1 da mTOR no controle da atividade transcricional dos receptores nucleares ativadores da proliferação peroxissomal gama (PPAR-gama), receptores dos glicocorticoides (GR) e receptores dos hormônios tireoidianos alfa (TR-alfa). Para isso, serão realizados experimentos de ganho e perda de função do complexo 1 da mTOR in vitro em células progenitoras de adipócitos isoladas da fração estroma-vascular, pré-adipócitos 3T3-L1 e fibroblastos de embrião de camundongo (MEF) e em in vivo em camundongos geneticamente modificados para ativação de mTOR específica no tecido adiposo (TSC knockout específico no tecido adiposo) alimentados com dieta obesogênica, onde serão investigados: a expressão, modificações de histonas e metilação do DNA na região promotora de genes responsivos a PPAR-gama, GR e TR-alfa, bem como, a expressão de DNA metiltransferases e correguladores e sua interação com PPAR-gama, GR e TR-alfa. Nos animais, também serão investigados processos metabólicos relacionados a captação e utilização de glicose e lipídios no tecido adiposo.