Modelos experimentais in vitro e in vivo e citometria de fluxo.

Resumo

Os experimentos propostos no projeto de Jovem Pesquisador intitulado "Imunoma funcional da saliva de Aedes aegypti", ao qual essa proposta se vincula, requer treinamento de técnicas em todas as suas etapas. Nas primeiras fases do projeto, uma atividade minuciosa, demorada e essencial é a dissecção em larga escala de glândulas salivares das fêmeas do mosquito Aedes aegypti, para permitir a caracterização inicial de suas atividades. Paralelamente, diversos ensaios de imunologia celular serão realizados in vitro e também necessitarão de capacitação técnica para realização e manutenção de culturas celulares e análises por citometria de fluxo. Finalmente, os ensaios in vivo somente poderão ser realizados após treinamento em técnicas de manipulação animal, conforme exigido pela Comissão de Ética em Experimentação Animal do Instituto de Ciências Biomédicas da Universidade de São Paulo. Nosso recém criado laboratório no Departamento de Imunologia ainda carece de recursos e equipamentos básicos para iniciar suas atividades, o que esperamos contemplar com a verba do projeto de Jovem Pesquisador. Com o início de nossas atividades científicas, recrutaremos estudantes que desenvolverão subprojetos vinculados a essa proposta e por esse motivo carecemos também de um suporte técnico específico para realização dos experimentos. Por esse motivo pleiteamos uma bolsa de Treinamento Técnico Nível 3 em período integral (40 horas semanais) pelo período de 2 anos com o objetivo de sanar essa deficiência. O bolsista selecionado para essa posição será treinado em técnicas de dissecção de glândulas salivares de Aedes aegypti, preparo de culturas celulares das mais diversas (células dendríticas, macrófagos, mastócitos e linfócitos T), manipulação, inoculação, tratamento e vacinação dos animais usados nos modelos experimentais, além do preparo, coleta e análise de amostras nos citômetros de fluxo do Departamento (BD FACS CaliburTM e BD FACS CantoTM II). Uma vez treinado, esse bolsista auxiliará na geração de recursos humanos, pois complementará a atividade dos estudantes de iniciação científica e pós-graduação, auxiliando-os nos experimentos e realizando também seu treinamento.