Investigação do papel da Prostaglandina F2-alfa sintase na interação entre Leishmania braziliensis e hospedeiro

Resumo

A descoberta de que os tripanossomatídeos produzem Prostaglandinas (PGs) é recente e o papel biológico das PGs no parasito ou sua influência sobre o curso da infecção são pouco conhecidos. Os nossos resultados do mestrado, que sugerem haver uma correlação entre nível de expressão da Prostaglandina F2 alfa sintase (PGFS) e o comportamento do parasito no hospedeiro, acentua a importância de investigar o papel desta PGFS. Uma publicação recente demonstrou mudanças no perfil proteômico e na infectividade de L. infantum após exposição in vitro a óxido nítrico. Os parasitos que sobreviveram a este tratamento (cerca de 30%) apresentaram elevada infectividade in vitro quando comparados ao controle e revelaram uma superexpressão de HSP70 e a expressão de PGFS. Além disso, análises in silico empregando o banco de dados dos genomas de Leishmania e outros tripanossomatídeos, TritrypDB (http://tritrypdb.org/tritrypdb/), em associação com os parâmetros de "drogabilidade" do banco de dados que cataloga potenciais alvos de drogas contra doenças tropicais, "TDR Target Database" (http://tdrtargets.org/) mostram que a PGFS, presente no secretoma, de L. major tem alto potencial "de drogabilidade". Esses dados em conjunto com os nossos dados do Mestrado nos levaram a propor um projeto de Doutorado para investigar a possível correlação entre os níveis de LbrPGFS (e de seu produto Prostaglandina F2-alfa), e o grau de infecção e características do tropismo do parasito na progressão da doença em modelo animal. As principais metas incluirão analisar diferentes isolados clínicos de L.V. braziliensis retirados de lesões cutâneas e mucosas quanto aos níveis de expressão da enzima LbrPGFS, as características da carga parasitária na lesão primária e análise do perfil da resposta inflamatória. Para confirmar a correlação entre nível de PGFS e padrões de infecção e tropismo serão gerados mutantes de L. braziliensis (linhagem referência Lb2904) nocaute e superexpressor de PGFS (LbrM31_V2.2410). Esses mutantes serão também engenheirados para superexpressar o gene da enzima Luciferase, integrado ao locus ribossômico, o que deverá permitir a análise das características de tropismo dos mutantes, por microscopia intravital, além das análises acima mencionadas.