Organogênese in vitro e transformação genética de variedades de tangerina

Resumo

O Citrus possui ampla diversidade genética e o grupo das tangerinas é aquele que corresponde à maior. No Brasil, a citricultura constitui importante segmento na estrutura sócio-econômica, caracterizada como uma importante atividade agroindustrial, credenciando o país, nas últimas décadas, como o maior produtor mundial de laranja e o maior produtor e exportador de suco concentrado e congelado. Atualmente, o huanglongbing (HLB), doença causada pela bactéria Candidatus Liberibacter spp, é a principal ameaça da cultura, a qual ainda não foram encontradas espécies tolerantes. O melhoramento genético tradicional tem apresentado limitações à obtenção de novas variedades porta-enxerto e copa, devido à descontinuidade nos programas estabelecidos e a fatores ligados à complexidade do gênero. Na tentativa de sobrepor essas barreiras, a transformação destaca-se por permitir a introdução de genes exógenos, os quais, além de reduzir o período de obtenção de material melhorado geneticamente, poderão, principalmente, conferir resistência a doenças em variedades de interesse agronômico. Desse modo, o objetivo do projeto de pesquisa consiste no estudo da organogênese in vitro de segmentos de epicótilo e internodais de tangerina, sob influência do regulador vegetal BAP e na obtenção de plantas transgênicas, a partir de protoplastos, segmentos de epicótilo e internodais, com o gene que codifica o peptídeo antibacteriano atacina A (attA), controlado pelos promotores AtSUT2 e AtPhP2, visando a expressão gênica específica nos vasos do floema. As plântulas identificadas como transgênicas por PCR serão aclimatizadas e posteriormente transferidas para casa-de-vegetação específica para o cultivo de plantas transgênicas. Análises de 'Southern blot' serão realizadas nas plantas PCR positivas aclimatizadas, para confirmação da integração e transcrição do transgene. As primeiras linhagens de plantas transgênicas regeneradas serão inoculadas com Candidatus Liberibacter asiaticus para a avaliação do nível de resistência.