Silenciamento gênico pós-transcricional por interferência por RNA (RNAi) como terapia antiviral para a raiva

Resumo

A raiva é uma zoonose de evolução 100% letal continua um problema de saúde pública. O protocolo atual utilizado para tratamento da raiva humana propõe o uso de antivirais como quetamina, ribavirina, midazolam e amantadina, mas falta a reprodutibilidade do mesmo em pacientes humanos é um problema atual. Este projeto tem por objetivos testar in vitro em células da linhagem N2A protocolos antivirais baseados em interferência por RNA (RNAi) utilizando short-interfering RNAs (siRNAs) contra a seqüência-líder e conta mRNA da nucleoproteína de amostras de vírus da raiva (RABV) fixa (PV) e duas amostras de campo (isoladas de cão e de bovino) com diferentes doses letais e protocolos de transfecção, aplicando-se a seguir in vivo em camundongos o protocolo mais eficiente também frente às três cepas virais por administração de siRNA via intra-craniana, medindo-se as eficiências de inibição in vitro e in vivo por imunofluorescência direta e PCR em tempo real para mRNA de N, além de se avaliarem possíveis efeitos tóxicos por meio de PCR em tempo real para mRNA de Beta-actina. Pretende-se com isto contribuir para o desenvolvimento de antivirais que possam ser somados àquelas já existentes para aprimorar o tratamento de pacientes com raiva e diminuir a letalidade da doença. (AU)