Avaliação in vitro da biocompatibilidade de materiais reembasadores resilientes.

Resumo

O objetivo deste estudo será avaliar a biocompatibilidade de 2 materiais reembasadores à base de silicone (Ufigel P e Sofreliner S), 2 à base de resina acrílica (Durabase Soft e Trusoft) e 2 condicionadores de tecidos (Softone e Dentusoft) por meio da citotoxicidade, da análise da morfologia celular, do padrão de morte celular e da mensuração de citocinas liberadas. As três primeiras análises serão realizadas utilizando-se células L929 e HaCaT, enquanto a última, macrófagos RAW 264,7. Corpos-de-prova (n=80) de cada material (10 X 1 mm) serão confeccionados e colocados, individualmente, em tubos de ensaio com 3 ml de meio de cultura (Eagle ou DMEM) e incubados a 37º C por 24 e 48 horas. Os eluatos desses dois períodos serão diluídos em meio de cultura, por diluição seriada, e colocados em contato com cada uma das linhagens celulares avaliadas. Esse procedimento será realizado a fim de se obter número de diluições necessário, de cada eluato, para se obter o IC 50 (concentração do eluato que induz 50% de morte celular). Para se determinar essa concentração, a viabilidade celular será avaliada pelo método colorimétrico do MTT que tem como princípio a redução do sal MTT pela desidrogenase mitocondrial das células vivas. Posteriormente, as concentrações (IC50) de cada eluato serão utilizadas para avaliar, nas culturas celulares, os seguintes parâmetros: 1) a morfologia, analisada, qualitativamente, em microscópio eletrônico de varredura (MEV); 2) o padrão de morte celular induzido pelos materiais, por meio do teste de anexina V - iodeto de propídeo (PI), mensurado em citômetro de fluxo; 3) a expressão do RNAm das citocinas IL-1² e TNF-±, quantificadas utilizando a técnica da reação em cadeia da polimerase em tempo real (PCR em tempo real). Todos os experimentos serão realizados em 2 ocasiões distintas. Os resultados quantitativos obtidos serão submetidos à análise estatística que será realizada ao nível de significância de 5%.