Efeito da trombina sobre a produção de proteínas da matrix e TNF-alfa por células-tronco mesenquimais originadas da medula óssea de ção.

Resumo

Este trabalho tem como objetivo avaliar, in vitro, o papel da trombina sobre aproliferação e expressão de Colágeno tipo I e III, fibronectina e laminina por célulastroncomesenquimais originárias da medula óssea de cães. As células-tronco serãoobtidas de cães adultos jovens, sem raça definida, com idade aproximada de 1 ano,sendo que o material da medula óssea será obtido por aspiração na região da cristado osso ilíaco dos cães. As células-tronco mesenquimais serão separadas pelométodo de purificação utilizando-se Ficoll-PaqueTM Plus. Posteriormente as célulasserão cultivadas em meio de cultura Dulbecco´s modificado por Eagle (D-MEM) paraa proliferação das células. Após a terceira passagem, as células serão plaqueadas eestimuladas com trombina nas concentrações de 5, 10 e 50 U/mL e a expressão doRNA mensageiro para Colágeno tipo I, colágeno tipo III, fibronectina e TGF-beta e aprodução de TNF-± serão avaliadas por RT-PCR em tempo real e ELISA. Seráutilizado teste t de student (ANOVA) com correção de Bonferroni para determinar asignificância da diferença entre os grupos do mesmo ensaio.