Papel funcional da dissulfeto isomerase proteica no processamento da fibrilina-1 e homeostase redox na sindrome de marfan

Resumo

As manifestações cardiovasculares em especial o desenvolvimento de aneurismas aórticos, são a principal causa de morbimortalidade associadas à Síndrome de Marfan (SM), que se associa a vários tipos de mutação na fibrilina-1, proteína da matriz extracelular. Entretanto, as bases celulares e moleculares das conseqüências da mutação da fibrilina-1 no fenótipo vascular e patogênese dos aneurismas permanecem pouco conhecidas. Dados preliminares mostraram interação entre fibrilina-1 e a chaperona redox dissulfeto isomerase protéica (PDI), que sabemos regular a atividade da NADPH oxidase vascular. Nossa hipótese é que PDI pode mediar uma fisiopatologia redox das alterações vasculares na SM. O objetivo do projeto é investigar, em modelo celular, o papel funcional da PDI no processamento da fibrilina-1 normal e mutada, avaliando os efeitos na homeostase redox, bem como nos marcadores fenotípicos associados à fisiopatologia da SM. Objetivos específicos: 1) Examinar em fibroblastos embrionários de camundongos SM a associação entre PDI e fibrilina-1, investigando possíveis agregados envolvendo estas proteínas; 2) Investigar, em MEFs wild-type (WT) e SM, efeitos da incubação com TGF-5 ou angiotensina II em variáveis descritivas de homeostase redox, resposta a proteínas mal-enoveladas e composição da matriz extracelular; 3) Avaliar, em MEFs WT e SM, os efeitos da perda de função da PDI ou NADPH oxidase (isoforma Nox4) no processamento da fibrilina-1 e colágeno e em variáveis descritivas de homeostase redox e resposta a proteínas mal-enoveladas. Estes dados poderão indicar novos mecanismos relevantes para compreensão da patologia vascular da SM e implicações funcionais da associação entre PDI e NAPDH oxidase (AU)