Avaliação do efeito da descompensação do Diabetes Mellitus sobre a expressão de genes do sistema imune e sobre lesões no DNA em pacientes com periodontite crônica.

Resumo

Este estudo propõe-se a investigar o efeito da descompensação do Diabetes Mellitus sobre a expressão de genes relacionados ao sistema imune e sobre lesões no DNA em pacientes com periodontite crônica. O desenvolvimento deste projeto visa complementar outro projeto de pesquisa em andamento na Faculdade de Odontologia de Araraquara (FOAr/UNESP), sob responsabilidade da Profa. Dra. Silvana R. Perez Orrico (Processo FAPESP 2007/08362-8), que pretende avaliar a influência da peroxidação lipídica sobre marcadores inflamatórios em pacientes portadores de Diabetes Mellitus tipo 2 (DM2) com periodontite crônica. Os pacientes que serão investigados neste estudo são os mesmos incluídos no citado projeto onde estão sendo selecionados 90 pacientes divididos em 3 grupos: Grupo 1 (diabetes compensado); Grupo 2 (diabetes descompensado) e Grupo 3 (controle-sistemicamente sadio). O controle metabólico nos pacientes dos grupos 1 e 2 está sendo avaliado pelo percentual de hemoglobina glicada (HbA1c), sendo considerados metabolicamente descompensados quando a HbA1c for > 8,0%. Todos os pacientes estão sendo avaliados quanto ao exame periodontal completo, exame físico e avaliação laboratorial da glicemia de jejum, perfil lipídico e níveis de peroxidação lipídica (LDL oxidado e do Malonaldeído [MDA]). Como no projeto citado serão avaliados os níveis plasmáticos de proteínas com importante papel no sistema imune como as citocinas IL-1, IL-2, IL-4, IL-5, IL-6, IL-10, IL-12, IL-32 e TNF-alfa pretende-se neste projeto investigar a expressão gênica (RNA mensageiro) dessas mesmas proteínas, para verificar se ambos correlacionam-se entre si e se são influenciados ou não pela descompensação do diabetes e/ou pela peroxidação lipídica. Sabe-se que o DM2 e o excesso de espécies reativas do oxigênio (ROS) podem ter efeitos genotóxicos, mas esses mecanismos precisam ser melhor estudados. Assim, o presente projeto também visa complementar aquele citado quanto à genotoxicidade, por meio de um teste que avalia a ocorrência de danos importantes e irreversíveis no DNA dos pacientes.De cada paciente será coletado sangue em tubo com EDTA e sangue em tubo heparinizado, para após centrifugação serem separados os leucócitos para, respectivamente, investigar a expressão gênica e a genotoxicidade. A expressão gênica será avaliada por meio de quantificação relativa em Tempo Real e a genotoxicidade por meio do teste do micronúcleo. Após obtenção dos resultados, estes serão avaliados quanto à sua aderência à curva normal para escolha entre testes estatísticos paramétricos ou não-paramétricos, ao nível de significância de 5%.Este estudo ajudará a compreender como a descompensação do diabetes e/ou a peroxidação lipídica em pacientes com periodontite crônica influenciam na expressão gênica de importantes proteínas do sistema imune, além de demonstrar se tais alterações metabólicas têm efeito genotóxico. Deve-se destacar que o apoio a este projeto viabilizará uma importante parceria entre docentes de diferentes departamentos da FOAr-UNESP, e entre essa instituição e a Faculdade de Medicina de Ribeirão Preto - USP, onde a pesquisadora responsável pelo presente projeto está realizando estágio de Pós-Doutoramento na área de Mutagênese.