Estudo da interação proteína-proteína entre NS5 do vírus da Febre Amarela e a proteína celular p54nrb/NonO

Resumo

A Febre Amarela é uma doença infecciosa não contagiosa que se mantém endêmica ou enzoótica nas florestas tropicais da América e África causando periodicamente surtos isolados ou epidemias de maior ou menor impacto em saúde pública. Essa doença é causada pelo vírus da Febre Amarela (YFV-Yellow Fever Virus), e transmitido pela picada do vetor Ae. aegypti. A replicação do vírus é um mecanismo complexo que envolve interações entre o RNA viral, proteínas virais e celulares e neste contexto, a proteína não-estrutural 5 (NS5) é a maior das proteínas virais e altamente conservada entre os Flavivirus. Apresenta atividade de RNA polimerase RNA-dependente (RNA-dependent RNA polymerase - RdRP) na região carboxi-terminal e atividade de metiltransferase em sua porção aminoterminal, a qual está envolvida na formação do cap RNA, podendo ser encontrada tanto no citoplasma quanto no núcleo e por esta razão pode apresentar funções relacionadas a interação e modificação de proteínas e funções celulares. A proteína celular p54nrb/NonO é um fator nuclear que exibe características multifuncionais atuando na regulação transcricional, splicing, relaxamento do DNA, retenção nuclear de fita dupla de RNA, processamento de RNA viral e controle da proliferação celular e interação com a RNA polimerase II em células eucariotas. Este estudo tem como objetivo caracterizar a interação entre a proteína N5S do vírus da Febre Amarela e a proteína celular p54nrb/NonO, bem como, observar o efeito in vitro da interação em células infectadas pelo YFV. Resultados preliminares obtidos por ensaio de duplo-híbrido em leveduras e confirmados por plasmid linkage revelaram que o domínio RNA polimerase de NS5 mostrou ser parceira interativa de p54nrb/NonO pois a interação foi capaz de promover a expressão dos genes repórteres HIS3 e ADE2. Desta forma, o conhecimento das interações proteína-proteína entre NS5 e fatores celulares pode fornecer dados significativos para o desenvolvimento de drogas que inibam especificamente uma interação proteína-proteína fundamental para o ciclo replicativo viral e o estabelecimento da Febre Amarela.