Efeito do Fator de Crescimento Insulina Símile I (IGF-I) na atividade da arginase de cepas de Leishmania (Viannia) braziliensis de pacientes com as diferentes formas clínicas de Leishmaniose Tegumentar Americana (LTA).

Resumo

Leishmanioses são doenças causadas por protozoários do gênero Leishmania e se apresentam sob forma tegumentar ou visceral. No Brasil, a leishmaniose tegumentar americana (LTA) é causada, na sua maioria, por Leishmania (Viannia) braziliensis e conhecem-se as formas cutânea (LC), mucosa (LM) e disseminada (LD) da doença. Esta diversidade de formas clínicas depende de uma complexa interação entre parasito e hospedeiro que desencadeia mecanismos protetores e/ou indutores de lesão, mecanismos esses não totalmente esclarecidos. Particularmente, os fatores de virulência do parasito podem influenciar tanto a maior invasão tecidual como uma resposta imune inflamatória. Neste projeto pretendemos estudar a possível diversidade de efeito de um fator de crescimento sobre cepas de Leishmania (V.) braziliensis, isolados de pacientes com formas clínicas distintas e sua correlação com a infectividade e/ou a forma clínica da doença. As cepas de L. (V.) braziliensis, neste estudo, serão as anteriormente identificadas quanto à espécie em projetos correlatos, de pacientes com LC, LM e LD, com acompanhamento clínico detalhado, da área endêmica de LTA, município de Corte de Pedra, BA.A fase inicial da interação parasito-hospedeiro é crucial para a resolução ou a instalação da doença onde atuam diversos fatores, entre eles fatores de crescimento. Um fator de crescimento que vem despertando grande interesse nos últimos anos, por sua ação e pleiotropismo, é o fator de crescimento insulina símile ("insulin-like growth factor" = IGF)-I, filogeneticamente bem conservado, com massa molecular de aproximadamente 7,5 kDa, presente na circulação e na maioria dos tecidos, e sendo produzido por células como hepatócitos, fibroblastos, células dendriticas e particularmente macrófagos. Além disso, sua expressão aumenta quando há inflamação na epiderme. Sendo, portanto, produzido por células presentes na pele, o IGF-I pode ser um dos primeiros fatores encontrados pela leishmânia na pele do hospedeiro, foco inicial da infecção. Em estudos anteriores do grupo observamos que IGF-I em concentrações fisiológicas induz in vitro o aumento na proliferação e fosforilação de moléculas de promastigotas e amastigotas de diferentes espécies, o mesmo não acontecendo com IGF-II. Em estudo in vivo com camundongos BALB/c infectados com Leishmania (L.) amazonensis pré incubada com IGF-I observou-se um aumento do tamanho da lesão com aumento do número de parasitos no sítio da lesão e um aumento do infiltrado inflamatório, com IGF-I favorecendo claramente o crescimento do parasito intracelular. Em estudo in vitro, macrófagos de camundongos BALB/c infectados com promastigotas e amastigotas de L. (L.) amazonensis, IGF-I induziu aumento da expressão e atividade da arginase e uma diminuição da produção de óxido nítrico (NO) e diminuição da expressão da sintase induzível do NO (NOS2). Além disso, IGF-I induz um aumento da expressão e atividade da arginase de promastigotas e amastigotas de L. (L.) amazonensis. No entanto, não se conhece nenhum estudo da participação de IGF-I na leishmaniose humana. A atividade da enzima arginase é considerada importante fator na interação leishmânia-hospedeiro, pois ela promove aumento da produção de poliaminas que são nutrientes para o parasito, com possível efeito no parasitismo e evolução da infecção. Neste projeto estudaremos, portanto, a expressão e a atividade da arginase, sob estímulo com IGF-I, em cepas de L. (V.) braziliensis isoladas de pacientes com diferentes formas clínicas da doença e o parasitismo, a produção de NO em linhagem macrofágica humana THP-1 infectada com L. (V.) braziliensis. Correlacionaremos ainda a atividade da arginase de leishmânia sob efeito de IGF-I ao parasitismo de macrófagos e/ou à forma clínica da LTA. Este estudo abrirá nova perspectiva para um melhor entendimento da patogenia da leishmaniose humana contribuindo para desenvolvimento de medidas profiláticas e terapêuticas.