Dissulfeto isomerase proteica como via integrativa entre estresse oxidativo e resposta a proteinas mal-enoveladas na reparacao a lesao vascular

Resumo

Estresse do reticulo endoplasmático (RE) ocorre em doenças vasculares e provavelmente na resposta vascular à lesão. Estresse sustentado do RE está associado a uma expressão aumentada da dissulfeto isomerase protéica (PDI), uma chaperona que regula e se associa à NADPH oxidase vascular, favorecendo a geração de oxidantes. PDI está também associada a maior trombogenicidade do endotélio vascular. A hipótese deste estudo é que a PDI atua como uma via integrativa na conexão entre estresse oxidativo e estresse do RE na reparação vascular à lesão e que o silenciamento da PDI possa definir um alvo terapêutico potencial no controle da resposta vascular. Os objetivos do estudo são: 1) Avaliar a expressão da PDI e de marcadores do estresse de RE na reparação vascular pós-lesão, bem como a influência da PDI: (a) no padrão de ativação da UPR, (b) na produção de ROS e (c) na expressão de subunidades da NAPDH oxidase; 2) Investigar, por meio de array de PCR, o papel da PDI em processos celulares associados à resolução da resposta à lesão, analisando em bloco indicadores de apoptose, proliferação, diferenciação, senescência e autofagia; 3) Analisar o papel da PDI na regulação da morte celular (TÚNEL) e na resistência de células neointimais e endoteliais à morte celular induzida por estressores exógenos como rapamicina; 4) Analisar a influência direta e indireta da PDI na trombogenícidade endotelial após a lesão. Estes dados poderão esclarecer mecanismos celulares de estresse oxidativo em doenças vasculares, com potenciais implicações terapêuticas no controle ou mesmo na regressão da celularidade de uma lesão vascular. (AU)