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Análise comparativa dos clones com possível atividade inibidora de plaquetas provenientes dos complexos salivares de sanguessugas Haementeria depressa: clonagem, expressão e caracterização

Processo: 08/55978-7
Linha de fomento:Bolsas no Brasil - Mestrado
Vigência (Início): 01 de setembro de 2009
Vigência (Término): 28 de fevereiro de 2011
Área do conhecimento:Ciências Biológicas - Bioquímica - Biologia Molecular
Pesquisador responsável:Fernanda Faria
Beneficiário:Jáfia Lacerda Alves
Instituição-sede: Instituto Butantan. Secretaria da Saúde (São Paulo - Estado). São Paulo , SP, Brasil
Assunto(s):Clonagem   Agregação plaquetária   Sanguessugas

Resumo

Animais hematófagos possuem em sua saliva substâncias que permitem a fluidez do sangue, para o sucesso de sua alimentação. Com isso, têm sido descritos diversos componentes, com atividades nos diferentes processos hemostáticos (coagulação, fibrinólise e agregação plaquetária). O complexo salivar da sanguessuga H.depressa vem sendo estudado por nosso grupo. Através da bioquímica clássica caracterizamos duas proteínas com interessantes papeis na hemostasia. O Lefaxin é um inibidor da coagulação sangüínea via FXa, sendo capaz de inibi-lo de forma dose dependente com Ki=4nM (FARIA et al, 1999). A Hementerina foi caracterizada como fibrino(geno)lítico (CHUDZINSKI-TAVASSI et al, 1998) e posteriormente descrita como um inibidor de agregação plaquetária pela via nitridérgica (CHUDZINSKI-TAVASSI et al, 2003). Mais recentemente, através de análises transcriptômica e proteômica dos complexos salivares desta sanguessuga, determinamos o perfil de transcritos e das proteínas produzidas pelo tecido. Dentre os transcritos mais abundantes detectámos alguns 3 clones similares ao inibidor de agregação plaquetária (LAPP) da sanguessuga H.officirtallis com diferentes graus de similaridade (FARIA et al, 2005), a produção destes componentes peto tecido foi confirmada pela análise proteômica (RICCI-SILVA et al, 2005). O LAPP possui cerca de 14kDa e pl de 4 (CONNOLLY et al., 1992) e inibe a ligação da plaqueta ao colágeno tanto peto epítopo do FvW quanto pelo domínio alfa2-betal (VAN ZANTEN et al., 1995). A expressão de um dos clones similares ao LAPP é objetivo de um projeto de pesquisa em andamento (07/58479-9) e do projeto de iniciação cientifica que deverá finalizar em dezembro de 2008 (08/50372-3). Assim, no presente projeto de mestrado, temos como objetivo expressar os demais clones com identidade ao LAPP, para que sejam analisados por estudos comparativos de estrutura e função entre si e com a molécula previamente descrita. (AU)

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