Avaliacao genetica e estrutural de componentes do sistema renina angiotensina e sua eventual associacao ao cancer de mama.

Resumo

O hormônio angiotensina II (AII) pertence ao sistema renina angiotensina (SRA) e está relacionado à gênese e manutenção da hipertensão arterial e a outras doenças cardiovasculares. As ações mais recentemente conhecidas da AII ocorrem a partir da ativação do receptor AT1, expresso em várias neoplasmas malignos, bloqueado por antagonistas de AII (losartan) e, indiretamente, por inibidores da enzima conversora de angiotensina ou ECA (captopril). Os componentes do SRA estão associados a vários tipos de câncer (pancreático, renal, pulmonar e mamário) pela atuação na formação de novos vasos sangüíneos (angiogênese) ou diretamente na célula cancerosa, ativando o receptor AT1. Neste projeto, o nosso objetivo é estudar a associação entre componentes do SRA e o desenvolvimento do câncer de mama em humanos, através de: 1) Estudo de três polimorfismos do receptor AT1 (A168G, C535T e T825A) quanto à eventual associação ao câncer de mama. Para isso, utilizaremos o sistema Custom TaqMan® SNP Genotyping Assays (Applied Biosystems) que são sondas e primers Assays-by-Design utilizados em ensaios de genotipagem de SNPs humanos; 2) e, por análise de polimorfismos no gene do receptor AT2 (G1332A; A1675G) e do polimorfismo no gene da ECA (T5529C) e ECA 2 (5' UTR) (A-5499C) no sangue (por PCR e PCR- RFLP), desde que estes polimorfismos são conhecidos pela associação ao risco de doença cardiovascular; 3) estudo da expressão gênica da enzima ECA 2 (por RT- PCR) em tecido mamário adjacente normal e com câncer e, 4) e, também temos como objetivo obter o fragmento peptídico do receptor AT1 selvagem e mutantes AT1-L262D e AT1-L265D, que apresentaram drásticas mudanças proliferativas e morfológicas (Corrêa e cols., 2005), por síntese química para estudar comparativamente por Dicroísmo Circular (Biofísica/ UNIFESP) e por Ressonância Nuclear Magnética (LNLS/ Campinas) as características estruturais dos peptídeos selvagem e mutante para futuramente obter desenho de droga (anticorpos) que mimetizem a mudança estrutural responsável pelo bloqueio da proliferação celular constitutiva, que ocorre via receptor AT1 em linhagens celulares de câncer de mama a fim de cassar ou diminuir a proliferação anormal. (AU)