Caracterizacao do gene lmhus1 e de sua participacao no fenomeno de amplificacao genica em leishmania spp.

Resumo

A proteína possivelmente codificada pela ORF LmF23.290 de Leishmania major contém um domínio Hus1. A proteína Hus1, já caracterizada em levedura e mamíferos, interage com as proteínas Rad1 e Rad9 formando o complexo 9-1-1. Este complexo participa na identificação de danos no DNA, no bloqueio da progressão do ciclo celular e na ativação de mecanismos de reparo. Em Leishmania spp. a ORF LmF23.290 está contida no lócus H, uma região de 45 Kb que codifica genes envolvidos em mecanismos resistência a drogas e na modução da virulência do parasito. O lócus H encontra-se amplificado em várias linhagens resistentes a drogas. A hipótese que iremos testar, e que norteia este pedido, baseia-se na possível participação de LmHUSI em mecanismos de reparo de DNA e no fenômeno de amplificação gênica em L. major. Assim, os objetivos específicos desta proposta incluem (i) a geração de linhagens nocaute para o gene LmHUSI; (ii) o estudo da competência para amplificação gênica de linhagens mutantes, heterozigotas ou nulas; (iii) a localização subcelular da LmHUSI; e (iv) a investigação do envolvimento desta proteína no controle da progressão do ciclo celular. (AU)