Clonagem e expressão da proteína de capsídeo/epítopo transmembrana do vírus da imunodeficiência felina para utilização no ELISA indireto para detecção de anticorpos

Resumo

O vírus da imunodeficiência felina (FIV) é um importante agente causador de distúrbios imunológicos associado a infectes oportunistas e neoplásicas, que podem ser ratais. Os gatos infectados podem permanecer assintomáticos durante longos períodos, além de apresentar uma grande variedade de sinais clínicos, por isso são necessários métodos diagnósticos laboratoriais específicos. O diagnóstico pode ser realizado por isolamento viral, PCR, e testes sorológicos como Imunofluorescência (IFA), Western blotting (WB) ou pelo ensaio imunoenzimático (ELISA). Atualmente, existem "kits" comerciais disponíveis baseados no ELISA que possuem o antígeno p24 imobilizado na fase sólida. O presente projeto tem como objetivo expressar o antígeno de capsídeo (CA) e o epítopo transmembrana (TM) do FIV, em E. coli, como proteína de fusão, e padronizar um novo ELISA, para detecção de anticorpos anti-FIV, utilizando esses antígenos recombinantes. Esse antígeno de fusão, conforme trabalhos recentes, apresenta, no ELISA, melhor especificidade e sensibilidade que aqueles baseados apenas em p24. A produção desse antígeno em vetor de expressão procariota como proteína de fusão com a cauda de histidina facilitará sua purificação e propiciará a obtenção desse antígeno a baixo custo, o que permitirá também o desenvolvimento de um ELISA indireto de baixo custo que poderá ser disponibilizado para os clínicos veterinários. (AU)