Susceptibilidade genética para fluorose dental: um estudo proteômico e metabólico com diferentes linhagens de camundongos

Resumo

O recente desenvolvimento de técnicas proteômicas tem permitido a análise do perfil proteico completo dos sistemas biológicos, permitindo um melhor entendimento da fisiologia normal do organismo, bem como dos mecanismos de doenças, descoberta de biomarcadores para detecção precoce de doenças, identificação de novas terapias e descobertas de fármacos. Este estudo usará técnicas proteômicas para analisar a expressão protéica diferencial em tecido renal, soro e urina de duas diferentes linhagens de camundongos (129P3/J e A/J) com diferença na resistência ou susceptibilidade à fluorose dentária. Cada linhagem de camundongo será dividida em 3 grupos de 6 animais cada e receberão, desde o desmame, durante 6 semanas, água com 0 (controle), 10 ou 50 ppm F. Será feita análise da cor dos incisivos uma vez por semana, durante todo o período experimental. Os animais serão eutanasiados, sendo coletados os rins (córtex e medula serão separados) e o soro. Será feita análise de flúor no soro, tecidos renais e fezes com o eletrodo, após difusão facilitada por hexametildisiloxano e da urina através da análise direta com eletrodo. Após a preparação das proteínas dos rins e da urina dos camundongos, as mesmas, bem como o soro dos animais, serão submetidos à eletroforese bidimensional. Os géis dos grupos controle e tratados serão escaneados utilizando-se o ImageScanner e analisados com o software ImageMaster Platinum. Os spots de interesse serão então excisados e analisados por espectrometria de massa (MALDI-TOF) para identificação das proteínas.