Imobilizacao/estabilizacao de d hidantoinase para producao de n carbamoil d fenilglicina.

Resumo

A cadeia lateral para produção enzimática de ampicilina é o estereoisômero éster metílico de D-fenilglicina, sintetizado a partir de D-fenilglicina. Esse último tem sido sintetizado quimicamente como mistura racêmica e purificado através de resolução racêmica com cânfora. A resolução é cara e uma alternativa a ser pesquisada é a síntese enzimática das cadeias laterais. D-feniIglicina pode ser sintetizada, partindo-se de hidantoína substituída e usando D-hidantoinase, que é capaz de catalisar a hidrólise estereosseletiva da rac-5-mono-substituídas hidantoinas para os N-carbamoil-D-aminoácidos, que podem ser convertidos para o D-aminoácido, por diazotação, ou por hidrólise enzimática usando N-carbamoil aminoácido amidohidrolase. Esta técnica tem a vantagem da esteroespecificidade das enzimas evitando a etapa de separação de isômeros, produzindo diretamente o enantiômero D para a síntese de ampicilina. Pretende-se imobilizar e estabilizar D- hidantoinase comercial, extraída de Vigna angularis, visando seu uso na síntese de carbamoil-D-fenilglicina, a partir de fenilhidantoina, iniciando o processo de síntese enzimática das cadeias laterais fenilglicina e p-OH-fenilglicina que poderão ser utilizadas para produção dos ésteres metílicos que serão usados para acilação do núcleo b-lactâmico, 6-APA gerando ampicilina e amoxicilina, em reações catalisadas por penicilina G acilase. A imobilização da enzima exige acompanhamento da formação dos estereoisômeros por cromatografia quiral e síntese do substrato fenilhidantoina. (AU)