Enzimas envolvidas na biossintese de glicosaminoglicanos sulfatados: identificacao, caracterizacao e aspectos filogeneticos.

Resumo

Os glicosaminoglicanos são polissacarídeos complexos, compostos de resíduos repetitivos e alternados de glucosamina e ácido urônico, alguns dos quais sulfatados. A presença destes resíduos modificados são críticos na síntese desses polímeros, sendo responsáveis pela sua atividade biológica. As enzimas 2-O-iduronosil-sulfotransferase, C5 - Epimerase e N-deacetilase/ N-sulfotransferase estão localizadas no Complexo de Golgi, e envolvidas na síntese de heparam sulfato e heparina. Estes glicosaminoglicanos possuem semelhanças estruturais, porém apresentam localização e funções distintas. Estas enzimas, já foram clonadas em diversas espécies animais, (de vertebrados a insetos), possuem conservação estrutural e no sítio catalítico. O presente projeto visa investigar a participação dessas enzimas na síntese de um polissacarídeo que possui uma estrutura totalmente atípica, intermediária entre heparam sulfato e heparina. Sua estrutura constitui-se de dissacarídeos repetitivos de N-acetilglucosamina- (1-4)-ácido-L-idurônico-2-sulfato, e foi denominado Acaram sulfato pelo fato de ser sintetizado em grande quantidade no molusco Achatina fulica, uma lesma gigante da África. Para a clonagem, primers degenerados serão confeccionados para as três enzimas já clonadas e disponíveis no GeneBank, baseando-se na conservação da enzima em questão, nas diversas espécies clonadas. (AU)