Anticorpos monoclonais contra stx1 e stx2: caracterizacao e padronizacao de ensaio de captura para deteccao das toxinas de shiga.

Resumo

Escherichia coli produtora da toxina de Shiga (STEC) é um patógeno emergente que está associado a um largo espectro de doenças humanas, incluindo colite hemorrágica (CH) e síndrome hemolítica urêmica (SMU), causadas pela ação das potentes citotoxinas de Shiga (Stx1 e/ou Stx2). Para detecção deste patógeno, há um número crescente de diferentes métodos comercialmente disponíveis, dificultando a escolha para o diagnóstico laboratorial, pois nem todos foram avaliados quanto a sua sensibilidade em laboratórios independentes. Além disso, estes testes não são utilizados na rotina laboratorial dos países em desenvolvimento, pois são extremamente caros. Por meio da descrição recente da presença de STEC no rebanho brasileiro e a emergência de casos clínicos de SHU no Brasil, associados à ausência de métodos diagnósticos disponíveis à nossa realidade, emergiram os objetivos do projeto. Neste sentido, antissoros contra as toxinas de Shiga (Stx1 e Stx2) foram obtidos em coelhos e utilizados em diferentes ensaios imunossorológicos (colony immunoblot, immuno dot e ELISA). Estes apresentaram uma alta especificidade, porém uma menor sensibilidade. Dando continuidade a esses experimentos, hibridomas anti-Stx1 já foram obtidos e hibridomas anti-Stx2 estão em processo de obtenção. A caracterização destes anticorpos monoclonais e padronização de um ensaio de captura e a sua avaliação são os objetivos deste projeto, permitindo assim, sua utilização no diagnóstico. (AU)