Patogenia da infecção pelo vírus da diarréia viral bovina em suínos: aspectos reprodutivos, neonatais e neurológicos

Resumo

A infecção pelo vírus da Diarreia Viral Bovina (BVDV) em suínos pode apresentar sinais clínicos semelhantes aos provocados pelo vírus da Peste Suína Clássica. Nos ruminantes, sabe-se que este vírus pode provocar diversos problemas, contudo, os estudos sobre a patogenicidade do BVDV em suínos são escassos. Este projeto se divide em quatro estudos que têm como objetivo elucidar aspectos importantes da patogenia reprodutiva, neonatal e neurológica causadas pela infecção do BVDV em suínos. O estudo 1 avaliará o efeito do BVDV-2 em diferentes períodos gestacionais em porcas experimentalmente infectadas. Será inoculado o BVDV-2 em dez porcas prenhes, as quais serão divididas em cinco grupos. Os grupos serão definidos mediante a inoculação em diferentes momentos do curso da gestação. Serão colhidas amostras de sangue a cada 3 dias, a partir do dia da inoculação até o dia do parto. Avaliações clínicas diárias serão realizadas nas porcas gestantes monitorando possíveis casos de abortamento. O estudo 2 tem como objetivo comprovar se o BVDV-2 participa como agente etiológico da Mioclonia Congênita em suínos. Será avaliado a atuação do agente no sistema nervoso central dos fetos à partir de dois modelos experimentais: por inoculação oronasal de porcas gestantes e pela inoculação fetal intrauterina. Para inoculação oronasal, serão utilizadas seis porcas em dois grupos experimentais, num grupo de quatro porcas será inoculado o BVDV-2 aos 45 dias de gestação e, em outro grupo de duas porcas será o controle. Para o segundo modelo experimental, realizar-se-á inoculação fetal intrauterina mediante procedimento cirúrgico em duas porcas aos 45 dias de gestação. Em ambos os estudos, 50% dos leitões nascidos serão eutanasiados e necropsiados no dia do parto para obtenção de amostras de órgãos para exame histopatológico, imuno-histoquimico e RT-PCR. Os demais neonatos mantidos vivos passarão por exame clínico diário para avaliação da ocorrência de sinais clínicos neurológicos. O sangue dos leitões será colhido a cada 3 dias, sendo observados até os 35 dias de idade. Conduzido simultaneamente, o estudo 3 visa determinar a condição de persistentemente infectado (PI) em leitões nascidos das porcas infectadas experimentalmente pelo BVDV-2 no terço médio da gestação (45 dias). Por isso, as avaliações e as amostras coletadas dos leitões durante os 35 dias serão utilizadas para identificação de PI. Se detectados, serão eutanasiados e necropsiados para coleta de amostras de órgãos para testes por RT-PCR, histologia e imuno-histoquimica. Já o estudo 4 objetiva identificar a importância do cachaço na transmissão do BVDV, avaliando no sêmen a presença do BVDV, o efeito nas células espermáticas e a capacidade de transmissão. Seis cachaços serão utilizados para a infecção experimental em uma avaliação de 90 dias, sendo 45 dias da fase de controle e 45 dias da fase inoculado. Amostras de sêmen e sangue serão coletadas a cada quatro dias, sendo analisadas por métodos moleculares, sorológicos e avaliações espermáticas. Para comprovação da transmissão do BVDV via sêmen, quatro porcas serão inseminadas com sêmen oriundo de um cachaço infectado e que esteja excretando e, serão utilizadas duas porcas para controle negativo. O acompanhamento será por 60 dias de gestação, com coletas de sangue a cada 4 dias, e os testes utilizados serão o RT-PCR e virusneutralização. (AU)