Sistema folicular: um novo protocolo para a maturação oocitária in vitro em bovinos

Resumo

A produção in vitro de embriões bovinos (PIV) tem sido utilizada para aumentar a fertilidade e a velocidade do melhoramento genético em rebanhos de corte e leite, embora sua eficiência seja reconhecidamente baixa. A maturação oocitária in vitro (MIV) é considerada o principal gargalo tecnológico da PIV. Os protocolos vigentes para MIV não refletem a fisiologia e determinam descompasso entre a maturação nuclear e citoplasmática do oócito. Os oócitos submetidos à MIV são oriundos de folículos em diferentes fases de desenvolvimento e heterogêneos quanto ao grau de condensação da cromatina e estoques de transcritos importantes para o desenvolvimento embrionário inicial. Este projeto objetiva o desenvolvimento de um novo sistema para MIV, o Sistema Folicular, que inclui estratégia para obtenção de população homogênea de oócitos, bem como um sistema de cultivo sequencial ajustado à fase de maturação dos oócitos recuperados, que mimetiza as condições intrafoliculares antes (fase pré-MIV) e durante a ovulação (fase MIV). A hipótese central deste projeto é que o Sistema Folicular proporciona aumento da produção e qualidade embrionária na PIV, quando comparado a um protocolo convencional com oócitos heterogêneos e MIV em apenas uma fase de cultivo com concentração supra-fisiológica de FSH. Os experimentos aqui propostos visam a validação de uma estratégia para obtenção de oócitos homogêneos de doadoras Nelore e Holandesas, bem como a avaliação do impacto do Sistema Folicular sobre a PIV em vacas Holandesas. O impacto do Sistema Folicular sobre a PIV será avaliado por meio das taxas de produção in vitro, de congelabilidade dos embriões e de concepção após transferência para receptoras. Adicionalmente, a fim de investigar os mecanismos pelos quais o Sistema Folicular pode beneficiar a competência para o desenvolvimento, avaliaremos os efeitos do Sistema Folicular sobre os padrões de expressão de mRNA das células do cumulus. (AU)