Farmacologia de oligopeptidases e peptídeos intracelulares

Resumo

O estudo das oligopeptidases resulta da descoberta dessas enzimas como cininases do sistema nervoso central de coelhos no início dos anos 70, pelo Prof. Antonio C.M. Camargo, na Faculdade de Medicina da USP em Ribeirão Preto. Estudos nossos (auxílios regulares Fapesp 96/05904-8 e 99/01983-9) e de outros grupos sobre secreção e localização subcelular da thimet-oligopeptidase (EC3.4.24.15; EP24.15) e neurolisina (EC3.4.24.16; Nln) sugeriram que mais de 90% dessas enzimas se concentram no interior das células; essa distribuição subcelular sugeria certa contradição à maior função originalmente demonstrada para essas oligopeptidases na geração e degradação de neuropeptídeos como a bradicinina (1-11). No meio intracelular fomos pioneiros em sugerir que a EP24.15 funciona no processamento e degradação de antígenos associados moléculas de histocompatibilidade de classe I (12,13), estudos esses corroborados posteriormente por diversos grupos (14-20). Ainda investigando a função intracelular das oligopeptidases, desenvolvemos mutantes cataliticamente inativos e capturamos substratos intracelulares dessas oligopeptidases (21-23), que inicialmente levaram à descoberta da hemopressina um novo peptídeo agonista inverso de receptores canabinóide tipo 1 (24-62). Esses achados nos levaram depois a propor que no meio intracelular, peptídeos sejam reguladores naturais de interações protéicas (63-78; Temático Fapesp 04/04933-2). Agora, propomos investigar a relevância funcional e as aplicações terapêuticas dos peptídeos intracelulares, sendo os objetivos centrais desse projeto: 1) investigar o possível uso terapêutico da hemopressina e de outros peptídeos intracelulares, 2) investigar mecanismos moleculares de ação dos peptídeos intracelulares, 3) realizar análises peptidomicas e desenvolver métodos para determinação da concentração absoluta de peptídeos em amostras biológicas, 4) caracterização fenotípica de camundongos C57BL6 knockout para a EP24.15, Nln e EP24.15/Nln. As possíveis aplicações clínicas desse conhecimento serão um objetivo constante durante o desenvolvimento desse projeto. (AU)