Development of biosensors for monitoring signaling in subcellular compartments: a powerful molecular tool for drug discovery

Resumo

Receptores acoplados a proteína G (GPCRs) constituem a maior família de transdutores de sinal em mamíferos a são considerados o principal alvo para a descoberta de drogas. Após o estímulo, os GPCRs ativam a proteína G e então recrutam β-arrestinas, as quais mais recentemente foram descritas como capazes de disparar uma sinalização independentes de proteína G que podem persistir mesmo nos endossomos internalizados. Avanços recentes na Farmacologia de GPCRs levaram a identificação de ligantes que ativam preferencialmente um ou outra via e são chamados agonistas tendenciosos (biased agonists). Além disco, embora seja aceito que a sinalização da proteína G seja interrompida com a internalização, dados recentes sugerem que a sinalização de proteína G posse ocorrer por GPCRs presentes em endossomos e outros compartimentos celulares. Esses mecanismos podem fornecer cascatas de sinalização com regulação espaço-temporal, com importantes consequências para respostas fisiopatológicas e o desenvolvimento de novas drogas. Para abordar tais aspectos, este projeto tem como objetivo investigar a regulação espaço-temporal do segundo "round" de ativação e sua importância para a fisiologia celular. Nos também querermos abordar se agonistas tendenciosos podem influenciar a ativação de proteína G a partir de compartimentos intracelulares com possível relevância funcional. Para isto, nós construiremos biosensores com a tecnologia BRET direcionados para diferentes compartimentos intracelulares. (AU)