Estudo da relação da via da integridade da parede celular e de genes de resposta ao estresse térmico no fungo patogênico humano Aspergillus fumigatus

Resumo

A. fumigatus é um fungo saprófita e também um agressivo patógeno oportunista, responsável pela vasta maioria dos casos de Aspergilose Pulmonar Invasiva, a forma mais grave das infecções ocasionadas por este fungo. A relativa resistência dos mamíferos aos fungos é atribuída à uma combinação entre a atividade do sistema imune e a endotermia. A temperatura mais elevada do sangue dos mamíferos cria um ambiente restritivo para a infecção fúngica. Fungos mais adaptados a sobreviver em temperaturas elevadas, como é o caso de A. fumigatus, apresentam melhor fitness no hospedeiro homotérmico. Todos os organismos apresentam uma massiva resposta celular universal durante o aumento de temperatura que corresponde a alteração do programa de expressão gênica que culmina com a síntese de proteínas de choque térmico. Em levedura, o fator de transcrição HSF1 coordena a expressão de vários genes relacionados a resposta ao choque térmico, dentre eles a chaperona molecular Hsp90. Tem sido verificado em outros organismos fúngicos que Hsp90 é capaz de regular a estabilidade e a função de componentes de importantes vias de sinalização celular. Dentre estas, destaca-se a via da integridade da parede celular (via CWI). Esta via é um elemento modulador central da organização, biossíntese e remodelamento da parede da célula fúngica. A parede celular é uma importante estrutura que fornece integridade estrutural e física sendo também um dos componentes celulares responsáveis pela interação com o hospedeiro durante a infeção. Entretanto, a parede celular e seus mecanismos regulatórios ainda não foram totalmente explorados como um alvo de novos quimioterápicos antifúngicos. O nosso laboratório identificou anteriormente uma interação genética entre os principais genes da via CWI (PkcA, MpkA e RlmA) e a chaperona molecular hsp90. Esses dados indicam uma correlação direta entre a função do sistema regulatório Hsf1-Hsp90 e a integridade da parede celular em A. fumigatus. Com o presente trabalho espera-se que a conexão entre a via CWI e de pelo menos dois importantes genes de resposta ao choque térmico em A. fumigatus seja melhor compreendida (isto é, hsfA(HSF1) e hsp90). Para tanto os principais objetivos desse projeto são: (i) caracterização molecular do gene que codifica o possível homólogo funcional do fator de transcrição HSF1 em A. fumigatus, hsfA; (ii) avaliação da atividade da via CWI durante o choque térmico em A. fumigatus; (iii e iv) expressão das proteínas recombinantes PkcA(409-1106), MpkA, RlmA e Hsp90 em sistema bacteriano visando a avaliação da interação física desses componentes da via CWI com a chaperona molecular Hsp90 em A. fumigatus. (AU)